Лада обзор: LADA XCODE Concept 2021: обзор, фото, новости

Lada Granta универсал 2021 обзор, комплектации и цены, характеристики

Обзор Granta Универсал

Держит слово

Моя сила не в блеске внешних украшений и вещей. Не в достижениях виртуальной жизни. Моя сила в том, что я выполняю обещания. Не меняю мировоззрение раз в полгода, а иду к цели и помогаю другим достичь ее.

Сочетая самое лучшее

Народный автомобиль стал ярче и привлекательнее: новая Granta получила черты современной ДНК стиля LADA.

«Икс»-графика переднего бампера, выразительная светотехника, новый рельеф багажника и, конечно, множество практичных улучшений – это LADA Granta, обновленная и любимая.

Новое в знакомом

А ведь правда, мы становимся лучше, умнее, опытнее, сильнее. Мы радуемся, открывая что-то новое в себе и рядом с собой. Замечаем, когда меняется действительно что-то важное – стиль, комфорт, возможности любимого автомобиля.

• Новые диски 15»
  Легкосплавные диски оригинального дизайна с чередующимися двухразмерными спицами и полированной поверхностью
• Форсунки омывателя
  перенесены с капота на облицовку ветрового окна — стильное и практичное решение
• Современная форма кузова
  Улучшенная аэродинамика автомобиля

• Легкое открытие багажника
  Наружная электрокнопка отпирания багажника — неотъемлемый атрибут современного комфорта и стиля
• Большие зеркала
  Гарантия отличной обзорности
• Настройка сиденья водителя
  Регулировка в диапазоне 40 мм

Забота о каждом

Что может сравниться с той радостью, когда дарят подарок, который ты давно хотел? Только радость человека, которому даришь то, о чем он давно мечтал. Но потребности даже близких людей иногда понять непросто. Хорошо, что есть машина, умеющая учитывать самые разные запросы.

• Комфорт пассажиров
  Перчаточный ящик с полочкой, два подстаканника и две ниши на облицовке тоннеля пола для мелких вещей и держателем для авторучки
• Освещение салона
  Функция задержки освещения салона после закрытия двери: освещение гаснет через 25 секунд или сразу после включения зажигания
• «Проводи меня домой»
  Функция задержки выключения света фар: забота о водителе и пассажирах даже после того, как они покидают машину

• Акустический комфорт
  Дополнительная шумоизоляция улучшает виброакустику салона: мягкие подкрылки в арках колес – из специального материала, эффективно гасит «пескоструй» и удары гравия
• Датчик дождя
  Незаменимая опция, когда ваш автомобиль окатят мутной водой из соседней лужи и при мелком дожде в долгой поездке
• Просторный 5-местный салон
  Удобно и практично: задний диван легко складывается в пропорции 2/3. Ограничители двери с функцией инерционного доводчика

Жизнь, приправленная мощностью

Гамма двигателей мощностью 87, 98 и 106 л.с. позволяет выбрать автомобиль в соответствии со своим стилем вождения.

Все моторы оснащены облегченной шатунно-поршневой группой, что улучшает характеристики и повышает ресурс.

• Рабочий объем
  1596 см
• Мощность
  87 л.с. (64 кВт) при 5100 об/мин
• Момент крутящий
  140 Нм при 3800 об/мин
• Топливо
  Бензин, min 95

• Рабочий объем
  1596 см
• Мощность
  98 л.с. (72 кВт) при 5600 об/мин
• Момент крутящий
  145 Нм при 4000 об/мин
• Топливо
  Бензин, min 95

• Рабочий объем
  1596 см
• Мощность
  106 л.с. (78 кВт) при 5800 об/мин
• Момент крутящий
  148 Нм при 4200 об/мин
• Топливо
  Бензин, min 95

Ответственность и безопасность

Мир скоростей требует повышенного внимания.

И повышенной отдачи: я слежу не только за собой, но и помогаю близким. А технологии помогают мне – ощутимо и эффективно! Особенно когда это комплекс электронных помощников водителя.

Благодаря проработанной силовой структуре кузова и современным системам безопасности LADA Granta универсал выполняет российские и европейские требования по защите водителя, пассажиров и пешеходов.

• Подушки безопасности
  Две фронтальные подушки безопасности – необходимая защита водителя и пассажира
• ЭРА-ГЛОНАСС
  Система экстренного оповещения работает даже в случае отключения аккумулятора
• Задние датчики парковки
  Более надежная страховка при маневрировании задним ходом

• Система торможения (ABS+BAS)
  Антиблокировочная система с усилителем экстренного торможения: сохранение устойчивости и управляемости автомобиля
• Курсовая устойчивость (ESC)
  Предотвращает занос автомобиля
• Помощник на подъеме
  Система HSA помогает при старте на подъёме. Ощущение уверенности при подъеме (доступно для комплектаций с АМТ)

Вождение с азартом

LADA Granta предлагает выбрать принципиально разные варианты трансмиссии. Для мегаполиса – «автомат». Для поселка – «механика».

Для абсолютно любых условий – автоматизированная трансмиссия (АМТ).

Механическая коробка передач

Надежность и четкость переключений. В LADA Granta применяется МТ с тросовым приводом: это улучшает виброкомфорт автомобиля. Благодаря немецкому механизму переключения передач четкость и информативность выведены на уровень европейских аналогов. В механической коробке передач для 8-клапанного мотора внедрено новое передаточное число главной пары: 3,9 вместо 3,7. Новая трансмиссия повышает динамику автомобиля и обеспечивает уверенное ускорение.

Автоматизированная механическая трансмиссия

Две коробки по цене одной. С АМТ возможно двигаться как в полностью автоматическом, так и в ручном режимах. АМТ получила обновленные настройки, а также сокращенное время переключения передач. «Городской» режим позволяет легко двигаться в пробках. Функция зимнего режима обеспечивает комфортное трогание на скользких покрытиях. Спортивный режим – для уверенного и динамичного старта.

Автоматическая коробка передач

Обеспечивает классический функционал АТ, максимально комфортное переключение передач и движение в городском потоке.

Комплектации и цены

Подушка безопасности водителя
Крепления для детских сидений ISOFIX
Блокировка задних дверей от открывания детьми
Иммобилайзер
Дневные ходовые огни
Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
Система вспомогательного торможения (BAS)
Подголовники задних сидений 2 шт.
Подушка безопасности переднего пассажира
Подголовники задних сидений 3 шт.
Охранная сигнализация
Противотуманные фары
Система электронного контроля устойчивости (ESC) (в Comfort только для АТ)
Противобуксовочная система (TCS) (в Comfort только для AT)
Система помощи при трогании на подъеме (HSА) (только для АТ и АМТ)

Розетка 12V
Бортовой компьютер
Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом

Воздушный фильтр салона
Легкая тонировка стекол
Центральный замок
Аудиоподготовка
Электроусилитель рулевого управления
Регулируемая по высоте рулевая колонка
Электростеклоподъемники передних дверей
Обогрев наружных зеркал
Кондиционер
Подогрев передних сидений
Электропривод и обогрев наружных зеркал
Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика
Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
Сиденье водителя с регулировкой по высоте
Центральный замок с дистанционным управлением
Электростеклоподъемники задних дверей
Обогрев ветрового стекла
Климатическая система
Датчики парковки задние
Датчики дождя и света

14» стальные диски
Запасное полноразмерное стальное колесо 14»
Колпаки колес декоративные
Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
Наружные ручки дверей в цвет кузова
Молдинги боковых дверей
15» легкосплавные диски
Запасное стальное колесо временного использования 14»

Характеристики

Расположение двигателя
База, мм
Объем багажного отделения в пассажирском / грузовом. ..
Колесная формула / ведущие…
Тип кузова / количество…
Количество мест
Колея передних / задних колес,…
Дорожный просвет под силовым агрегатом (полная…
Длина / ширина / высота по рейлингам,…

Тип двигателя
Система питания
Рабочий объем, куб. см
Код двигателя
Количество, расположение…
Максимальная мощность, кВт (л.с.) / об….
Максимальный крутящий момент, Нм / об….
Рекомендуемое топливо

Максимальная скорость, км/ч
Время разгона 0-100 км/ч, с

Городской цикл, л/100 км
Загородный цикл, л/100 км
Смешанный цикл, л/100 км

Снаряженная масса, кг
Объем топливного бака, л
Технически допустимая максимальная масса,. ..
Максимальная масса прицепа без тормозной системы /…

Тип трансмиссии
Передаточное число главной…

Передняя
Задняя

Рулевой механизм

Фотографии

Экстерьер

Интерьер

LADA-Granta – пятиместный переднеприводный универсал от АвтоВАЗ, который подвергся рестайлингу во второй раз в 2018 году. Теперь это еще более вместительный и надежный автомобиль с достаточно высоким клиренсом и багажником, расширяемым с 360 до 675 литров.

Совершенно новый дизайн

Изменения в основном коснулись передней и задней части кузова, здесь следует отметить:

• Точеный рельеф багажной двери и новые стойки задних фонарей
• Переработанную световую технику, в том числе противотуманные фары и повторители поворотных указателей на боковых зеркалах
• Рафинированные линии решетки радиатора «Икс» в хромированном костюме
• Практично расположенные форсунки омывающей стекло системы
• Обновленные «звезды» колесных дисков

Аэродинамика Лада Гранта универсал 2018 в целом выиграла за счет всех изменений, сделав автомобиль маневреннее и экономнее (расход 6,8/100 в смешанном цикле).

Внутренняя гармония

Сиденья в салоне прошли переработку: изменилась набивка, выбрана новая ткань для обтягивания, даже рисунок строчки стал иным. Подголовники демонстрируют улучшенную поддержку. Сиденье водителя можно регулировать в вертикальной плоскости.

Центральная панель украшена объемными вставками, цвет подсветки изменен на оранжевый. Все приборы расположены наглядно, в порядке необходимости. Продумана кнопка дистанционного открытия двери багажника и контакта с экстренными службами по навигации ЭРА-ГЛОНАСС. Подушек безопасности в первых трех комплектациях всего 2, зато в двух старших их количество достаточно для всех пяти пассажиров. Также можно добавить опции ассистентов парковки задним ходом, курсовой устойчивости, датчиков дождя и света, климат-контроля и подогрева сидений.

Двигатели и трансмиссия

Купить универсал Гранта предлагается с двигателем 1.6 литра, количество клапанов в котором диктуют его мощность – 87 л.с., 98 л.с. или 106 л. с. Поршни двигателя тоже переработаны, точнее, их заменили на Federal Mogul с ячейками под головки клапанов, дабы избежать их поломки в случае обрыва ГРМ

Вариантов трансмиссии всего три: 5 ступеней в механике, 4 – в коробке автомат. Тем, кто любит смешанный стиль вождения, предлагается «гибрид» АМТ. Автомобиль по уровню оснащения и безопасности достоин своей цены во всех пяти комплектациях. Чтобы убедиться в этом, запишитесь на тест-драйв уже сейчас.

Руководства по эксплуатации

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 26.10.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 16.07.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 24.03.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 09.01.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 29.10.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 10.10.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 04.09. 19

 Дополнение к руководству по эксплуатации LADA Granta Drive Active от 01.07.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 13.03.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 05.10.18

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 20.08.18

дилер LADA в г. Москва (Москва и МО)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений ткань. Цвет черный
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Двойной пол багажного отделения

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Датчики парковки задние
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 16» легкосплавные диски (только для 1. 6 МТ)
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• LADA Ride Select (селектор выбора режима движения) (только для МТ)
• Электронная блокировка дифференциала (EDL) (только для МТ)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1.8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Атмосферная подсветка салона
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Усиленная тонировка задних стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Обивка потолка черного цвета
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет черный
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Двойной пол багажного отделения

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Крыша кузова черного цвета
• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• LADA Ride Select (селектор выбора режима движения) (только для МТ)
• Электронная блокировка дифференциала (EDL) (только для МТ)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1.8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Атмосферная подсветка салона
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Усиленная тонировка задних стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Крыша кузова черного цвета
• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Атмосферная подсветка салона
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Усиленная тонировка задних стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Атмосферная подсветка салона
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Усиленная тонировка задних стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Крыша кузова черного цвета
• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений ткань. Цвет черный
• Розетка 12V на центральной консоли

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Аудиоподготовка

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 16» легкосплавные диски (только для 1.6 МТ)
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений ткань. Цвет черный
• Розетка 12V на центральной консоли

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 16» легкосплавные диски (только для 1.6 МТ)
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений ткань. Цвет черный
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Двойной пол багажного отделения

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Датчики парковки задние
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 16» легкосплавные диски (только для 1. 6 МТ)
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1.8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений ткань. Цвет черный
• Розетка 12V на центральной консоли

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 16» легкосплавные диски (только для 1.6 МТ)
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• LADA Ride Select (селектор выбора режима движения) (только для МТ)
• Электронная блокировка дифференциала (EDL) (только для МТ)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1.8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Обивка потолка черного цвета
• Панель приборов. Цвет черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет черный
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Двойной пол багажного отделения

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Датчики парковки задние
• Kамера заднего вида с динамическими линиями
• Кондиционер
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Мультимедийная система LADA EnjoY Pro с встроенными сервисами Яндекс. Авто (8’’ TFT-IPS ёмкостный HD дисплей, FM, 2 USB, Bluetooth, голосовое управление, Hands Free со сдвоенным микрофоном и функцией шумоподавления, Apple CarPlay, Android Auto), 6 динамиков

• Крыша кузова черного цвета
• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

• LADA Ride Select (селектор выбора режима движения) (только для МТ)
• Электронная блокировка дифференциала (EDL) (только для МТ)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира с функцией отключения
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Автоматическое запирание дверей при начале движения
• Автоматическое включение аварийной сигнализации при экстренном торможении
• Автоматическое отпирание дверей и включение аварийной сигнализации при столкновении
• Иммобилайзер
• LED-дневные ходовые огни
• Противотуманные фары с функцией освещения поворота
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Дисковые тормоза задних колес (только для 1. 8 МТ и АТ)
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC) с функцией отключения
• Противобуксовочная система (TCS)
• Система помощи при трогании на подъеме (HSА)
• Защита двигателя и подкапотного пространства

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов
• Центральный подлокотник с боксом
• Складная спинка переднего пассажирского сиденья
• Заднее сиденье с раскладной спинкой в пропорции 60/40
• Панель приборов. Цвет (по выбору) оранжевый/черный
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Отделка руля и чехла селектора КПП кожей
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетки 12V на центральной консоли, для задних пассажиров и в багажном отделении
• Розетка USB для задних пассажиров
• Выдвижной ящик под сиденьем переднего пассажира
• Двойной пол багажного отделения
• Подсветка мест входа-выхода в передних дверях

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте и по вылету рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев рулевого колеса
• Подогрев передних сидений 3х уровневый
• Подогрев задних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Датчики дождя и света
• Климат-контроль
• Охлаждаемый вещевой ящик
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Мультифункциональное рулевое колесо
• Аудиосистема (2DIN, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Рейлинги
• Декоративная насадка выпускной трубы
• 17» легкосплавные диски Proton
• Запасное стальное колесо временного использования 15»

LADA Vesta — Обзор.

Официальный сайт LADA в Беларуси

Обновлённая LADA Vesta

Седан LADA Vesta вместителен и удобен, при этом особое внимание уделено акустическому комфорту. Конструкция шасси объединяет плавность хода, проходимость и азартную управляемость. LADA Vesta отлично приспособлена для сложных климатических и дорожных условий: внешние панели кузова оцинкованы, силовой агрегат прикрыт мощной защитой, а на порогах и днище нанесено прочное антигравийное покрытие.

Классический стиль, оптимальный выбор

LADA Vesta

Совершенство –
в графике и характере

Стильная, стремительная, яркая, LADA Vesta задаёт современный стандарт дизайна LADA. Силуэт седана выдержан в единой «Икс»-концепции, он 100-процентно узнаваемый и гармоничный. Фирменный стиль обозначен в деталях: выделенной тёмным цветом облицовке радиатора, подштамповках по бокам, световозвращателях задних фонарей. За счет приподнятой подоконной линии, удлиненного капота и покатой крыши автомобиль смотрится динамично и атлетично.

Антенна в форме акульего плавника

Бескаркасные стеклоочистители – работают эффективно и не склонны к обмерзанию

Исключительно просторный салон

Исключительно просторный салон позволяет разместиться с максимальным удобством на передних креслах и на заднем диване – этому способствует высокий уровень эргономики сидений, которые обладают выверенной формой и специально подобранным наполнителем. Водительское кресло оснащено регулировкой высоты и поясничной поддержки. В сочетании с регулировкой руля по высоте и вылету это помогает подобрать удобную посадку, исходя из индивидуальных потребностей.

Мультимедийная система

LADA EnjoY Pro с Яндекс.Авто — мультимедийная система нового поколения, обеспечивающая полноценный функционал современного смартфона, интегрированного в автомобиль. LADA EnjoY Pro с Яндекс.Авто — это экран с HD-разрешением и высоким быстродействием, поддержка проецируемых систем Apple CarPlay и Android Auto.

6-диапазонная автоматическая коробка передач японской фирмы Jatco

Теплая опция для наших зим – обогрев руля. LADA Vesta согревает!

Трансформация багажного отсека

480-литровый багажник – это обязательное качество семейного седана LADA Vesta. Увеличить этот объем можно сложив спинку сиденья – как полностью, так и по частям, в пропорции 60/40.

Высокий уровень защиты

LADA Vesta – это высокий уровень защиты. Автомобиль обеспечивает отличную обзорность и уверенную проходимость, электроника постоянно мониторит дорожную ситуацию, кузов с применением сталей повышенной прочности надежно защищает водителя и пассажиров.

LADA Vesta – это возможность выбрать силовой агрегат в соответствии с индивидуальным стилем вождения и потребностями в динамике. 1,6л + «механика» — экономичный вариант. 1,8л + «механика» — солидный запас тяги! 1,6л + автоматическая трансмиссия – плавное движение и уверенный разгон! Ну а специальные настройки шасси обеспечивают комфорт и азартную управляемость.

Рабочий объем
1596 см
Мощность
106 л.с. (78 кВт) при 5800 об/мин
Момент крутящий
148 Нм при 4200 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5

Рабочий объем
1774 см
Мощность
122 л.с. (90 кВт) при 5900 об/мин
Момент крутящий
170 Нм при 3700 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5

Рабочий объем
1598 см
Мощность
113 л.с. (83 кВт) при 5500 об/мин
Момент крутящий
152 Нм при 4000 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5

Цветовая гамма

Дайвинг

Насыщенный синий, напоминающий о бесконечной глубине океана. Или неба? Дайвинг возможен в разных стихиях, но путь к ним начинается за рулем LADA Vesta

Обзор РИА «Воронеж».

Какие законы вступят в силу в июне-2021. Последние свежие новости Воронежа и области

В первом месяце лета власти попробуют победить рынок «левых» сим-карт, отрегулируют цены на зерно и гречку, возьмут под контроль пестициды, а также защитят пчел. Подробности о законах, которые вступят в силу в июне, – в традиционном обзоре РИА «Воронеж».

Гречка останется «дома» до осени

Фото – pixabay.com

Экспорт гречки из России приостановили до 1 сентября, следует из постановления правительства №684. Предполагается, что такая мера позволит сохранить достаточный объем этой крупы на внутреннем рынке и предотвратит рост цен на нее.

Меру ввели из-за резкого роста объемов экспорта гречки. С начала зернового сезона (июль 2020 года) до конца апреля 2021 года было вывезено 104 тыс. т, в то время как за предыдущий сезон – всего 40 тыс. т. Из-за такого скачка экспорта мог возникнуть дефицит продукта на внутреннем рынке, что в свою очередь способствует повышению стоимости.

В Минсельхозе также отметили, что в ближайшем будущем аграрии увеличат посевные площади этой культуры, чтобы ее хватало и на растущий экспорт, и на нужды внутреннего рынка.

Кстати, в России цена на гречку считается своеобразным «психологическим триггером». Как только эта крупа скачкообразно дорожает, люди начинают беспокоиться по поводу состояния цен на продукты в целом.

Цены на злаки попытаются стабилизировать

Фото – Наталья Трубчанинова (из архива)

С 2 июня в России будет действовать так называемая система зернового демпфера. Предполагается, что он защитит внутренний рынок страны от скачков цен на злаки, а соответственно, на хлеб, муку и соответствующие изделия. Система предусматривает непостоянную плавающую пошлину и субсидии для аграриев.

Теперь ставка пошлины будет меняться еженедельно. Ее будут рассчитывать исходя из мировых цен. Субсидии же будут поступать в регионы и распределяться между производителями зерна.

Пчел защитят от отравления химическими веществами

Фото – Андрей Архипов (из архива)

С 29 июня вступает в силу закон №490-ФЗ «О пчеловодстве». Он, в частности, призван уберечь пчел от отравления пестицидами и агрохимикатами. Согласно документу, сельхозпроизводители должны предупреждать пчеловодов о готовящейся обработке полей не позднее чем за три дня. Объявлять нужно через СМИ. Кроме того, закон запрещает применять для лечения пчел лекарственные препараты, которые не зарегистрированы в России, а на каждую пасеку должен оформляться ветеринарно-санитарный паспорт.

Этот документ Госдума пыталась принять много лет. В Минсельхозе отметили, что только в 2019 году отравление вредными веществами спровоцировало массовую гибель пчел в 30 регионах страны. Сокращение численности или исчезновение этих насекомых может привести к тому, что прекратят размножаться многие цветущие растения, произойдет упадок сельского хозяйства, а это чревато голодом и даже изменением климата.

Пестициды возьмут под контроль

Фото – Андрей Архипов (из архива)

С 29 июня Россельхознадзор начнет контролировать оборот пестицидов в стране. По закону «О безопасном обращении с пестицидами и агрохимикатами» ведомству будут подконтрольны соблюдение правил производства химикатов, их ввоза через границу, продажи, хранения, применения и утилизации.

Также закон предусматривает создание единой государственной информационной системы, в которую будут вносить все данные о пестицидах и ядохимикатах, полученные Россельхознадзором. База данных поможет вести учет произведенных и проданных партий, а также контролировать их применение.

Начнут выявлять владельцев ранее учтенной недвижимости

Фото – Михаил Кирьянов (из архива)

Закон №518-ФЗ, позволяющий органам государственной власти самостоятельно разыскивать собственников недвижимости, которые зарегистрировали на нее права в 1990-е годы, вступит в силу 29 июня. Будут использоваться сведения архивов, органов внутренних дел, ЗАГСов, налоговых органов и нотариусов.

Дело в том, что в начале 90-х действовало специфическое законодательство, которое позволяло не указывать практически никаких сведений о владельце жилья. В государственном реестре, например, может значиться только фамилия собственника жилья или земли, даже без инициалов. В результате совершенно невозможно понять, например, кто из тысяч жителей региона по фамилии Иванов владеет конкретной квартирой или участком земли. Это создает множество правовых коллизий, мешает людям защищать свои имущественные права, а ФНС – собирать налоги.

Если власти случайно указали вас как владельца не принадлежащей вам недвижимости, то можно направить им свои возражения. Это также предусмотрено новым законом.

Корпоративные «симки» привяжут к аккаунтам сотрудников на «Госуслугах»

Фото – Андрей Архипов (из архива)

Поправки в закон «О связи», которые вступят в силу 1 июня, призваны уменьшить количество телефонных номеров, владельцев которых невозможно вычислить. Пока фирмы могли регистрировать любое количество корпоративных карт, не привязывая их номера к конкретным пользователям, некоторые недобросовестные граждане пользовались этим, создавая фирмы-однодневки. Они регистрировали множество анонимных мобильных номеров, а затем продавали эти номера мошенникам. Теперь же фирмы и предприятия обяжут привязывать корпоративные номера телефонов своих сотрудников к их аккаунтам на сайте «Госуслуги».

Заметили ошибку? Выделите ее мышью и нажмите Ctrl+Enter

Салон ТСС АВТО — официальный дилер ГАЗ, ВАЗ, CHANGAN

ГК «ТСС АВТО» продает автомобили с 1993 года. В настоящее время является официальным дилером ОАО «ГАЗ», ПАО «АВТОВАЗ» и CHANGAN в Нижнем Новгороде.  Помогаем приобрести автомобили этих марок на хороших условиях и обеспечиваем их техническое обслуживание.

ГАЗ

Горьковский автомобильный завод является легендой отечественного автопрома. Завод разрабатывает и выпускает автомобили всех типов: легковые, коммерческие, грузовые, автобусы. Производство с каждым годом совершенствуется. Обновленные модели привлекают функциональностью, экономичностью, простотой управления и изящными дизайнерскими решениями.

На сайте официального дилера ОАО ГАЗ в Нижнем Новгороде вы можете купить с завода по ценам производителя новые автомобили ГАЗель NEXT, Соболь, ГАЗон, Фермер, ГАЗель Бизнес Борт, а также ГАЗ 3309-3308.

АвтоВАЗ

Продукция Волжского автомобильного завода отличается высокой практичностью и приспособленностью к отечественным дорогам. С приходом в компанию экс-дизайнера Volvo и Mercedes-Benz Стива Маттина автомобили преобразились внешне, а таже получили эргономичный интерьер. Примером могут служить динамичный седан Lada Vesta или солидный хэтчбэк Lada Xray.

Автосалон «ТСС-Авто», официальный дилер ПАО «АвтоВАЗ», предлагает полный модельный ряд этого производителя.

CHANGAN

Changan — крупнейший производитель автомобилей. Автомобили Changan — результат непрерывных исследований и разработок, улучшения качества и внедрения инноваций.

Продукция Changan адаптирована под повседневные нужды современного городского жителя и сочетает в себе комфорт, динамику и универсальность.

Покупка авто в «ТСС Авто»

В «ТСС-Авто» вы можете купить выбранное авто в лизинг, в кредит, по программе обмена старых автомобилей на новые Trade-in. Следите за нашими объявлениями о проводимых акциях, чтобы не пропустить возможность купить авто со скидкой. Мы проводим сервисное обслуживание и обеспечиваем полным комплектом запчастей.

По вопросам комплектации и цены автомобилей обращайтесь по телефону (831) 257-60-50. Адреса автосалонов и их размещение на карте указаны на страницах сайта.

Понимание FRET как инструмента исследования сотовой связи

Измерение FRET, основанное на количественной оценке сенсибилизированного излучения акцептора, является наиболее надежным среди всех методов, основанных на интенсивности. Сенсибилизированное излучение акцептора — это количество излучения акцептора в канале FRET из-за резонансной передачи энергии возбуждения от донора к акцептору [59]. Одновременное измерение излучения индивидуальной флуоресценции от донора и акцептора от одного и того же образца по сравнению с несколькими образцами исключает проблемы, связанные с вариациями, такие как изменения в плотности донора или квантовом выходе флуоресценции [59,68].Тем не менее, оценки FRET более точны и их легче выполнять в случае, когда эмиссии донора и акцептора хорошо разделены. В противном случае этот метод предполагает введение нескольких поправочных коэффициентов, связанных с перекрестными помехами флуорофора, , т.е. , взаимным возбуждением донора и акцепторов на длине волны возбуждения другого красителя и просачиванием флуоресцентного излучения донора и акцептор к каналу обнаружения, соответствующему другому красителю. Независимые контрольные образцы донора и акцептора могут помочь решить проблемы, связанные с вышеуказанными проблемами.Многочисленные методы были разработаны с целью количественной оценки сенсибилизированного акцепторного сигнала. Хотя количественные подходы, строго определяющие эффективность FRET, являются предпочтительными [53], полуколичественный метод, обеспечивающий неоткалиброванные индексы FRET с сомнительной теоретической базой, также имеется в большом количестве в литературе [59]. Индексы FRET — это относительные значения, зависящие от инструмента, разработанные в соответствии с целями исследований. Они являются качественными по своей природе, однако некоторые из них кажутся более чувствительными и последовательными в тех случаях, когда методы, основанные на эффективности FRET, имеют тенденцию страдать, например, когда отношение донора к акцептору ниже 1 [59].Благодаря простой математической структуре эти подходы могут показаться довольно привлекательными для биологов, которые больше озабочены изучением возможности взаимодействия между двумя макромолекулами в простом формате «да» или «нет» или знанием последствий биологической реакции в ассоциации белки в относительном выражении. Основываясь на литературе, методы измерения сенсибилизированного излучения можно разделить на три группы, основным отличием которых является процесс анализа сигналов FRET: (1) двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения; (2) трехканальное измерение излучения; и (3) спектральный анализ FRET.

Двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения

Двухканальное измерение коэффициента излучения широко применялось как в микроскопии [74,75], так и в проточной цитометрии [76,77] в качестве датчиков белок-белковых взаимодействий. В основном, практика заключается в освещении образца с двойной меткой (донор и акцептор) длиной волны возбуждения донора, а затем сбор сигналов в обоих каналах донора и FRET, , т. Е. ., В диапазоне длин волн, соответствующем пику излучения донор и акцептор соответственно.Индекс FRET, определяемый как отношение интенсивностей флуоресценции в FRET и донорских каналах, широко используется благодаря тому факту, что это соотношение довольно согласовано [19,52,78]. Альтернативное двухканальное измерение отношения возбуждения также было описано ранее, когда измерения на длине волны излучения акцептора проводились при последовательном возбуждении образца FRET с длинами волн донора (канал FRET) и акцептора (канал акцептора). В этом случае параметр, пропорциональный эффективности FRET, выражается как отношение флуоресценции в канале FRET к флуоресценции в акцепторном канале [78,79].В первую очередь, вышеупомянутые методы игнорируют множественные перекрестные помехи и свойства просачивания флуорофоров, такие как прямое возбуждение акцептора на длине волны поглощения донора. Однако эти методы очень полезны до тех пор, пока соотношение концентраций доноров и акцепторов остается постоянным, например, во внутримолекулярных исследованиях FRET [52,54] с использованием FRET-сенсоров.

Трехканальное измерение излучения

Трехканальное измерение излучения требует сбора трех независимых сигналов от одного и того же образца.Эти сигналы различаются либо длиной волны возбуждения, либо спектральным диапазоном регистрируемых детекторов. Фактически, этот метод аналогичен двухканальному измерению с дополнительным третьим каналом, что делает возможными строгие выводы о сигналах, отличных от FRET. Были опубликованы многочисленные исследования, представляющие такую ​​схему с различным уровнем строгости в отношении перекрестных помех или сквозных исправлений [59]. Для трехканального измерения оценка FRET была продемонстрирована как с точки зрения индексов FRET [52,53,80,81], так и эффективности FRET [15,54,68,69,82,83].Измерения требуют сбора сигналов только для донора, только для акцептора и для образцов с двойной (донорно-акцепторной) меткой при одних и тех же обстоятельствах. Ниже мы опишем три наиболее популярных трехканальных измерения на основе индекса FRET с терминологией FRET, используемой соответствующими авторами:

(a) Метод исправленного FRET ( F ^c ): Этот метод был введен Youvan и др. ., для эпифлуоресцентного микроскопа [80]. Они просто генерировали изображение FRET с поправкой на флуоресценцию от фона и проступание.Однако вклад взаимного перекрестного возбуждения в донорных и акцепторных каналах, который в их случае был минимальным, при расчетах не учитывался. Точно так же метод не выполняет нормализацию концентрации доноров и акцепторов. Следовательно, он по своей сути страдает проблемами, связанными с изменчивостью концентрации флуорофора. Фактически, даже при одинаковой эффективности FRET сигнал FRET отличается для образцов, в которых используются различные концентрации доноров и акцепторов.Таким образом, он подходит в условиях, когда концентрация донора к акцептору постоянна или известна заранее. Исправленный FRET выражался в следующей форме:

F ^c = F _f — [( F _d / D _d ) × D _f ] — [( F _a / A _a ) × A _f ]

(6)

В уравнении (6) F , D и A представляют FRET, донорный и акцепторный каналы, соответственно, тогда как индексы « f, d и a представляют собой FRET, донорные и акцепторные образцы соответственно.Спектральное просачивание для донора ( F _d / D _d ) и акцептора ( F _a / A _a ) рассчитывается для образцов только донора и только акцептора соответственно . Также предполагается, что фон из изображений был вычтен в приведенном выше уравнении.

(b) Метод FRET net (FRETN): Gordon et al . представили метод FRETN для преодоления основной проблемы с помощью метода F ^c . F ^c линейно пропорционален концентрации флуорофоров; поэтому они предложили, чтобы уравнение (6) было дополнительно нормировано произведением сигналов донора и акцептора [54]. Этот новый метод, однако, обеспечивает чрезмерную компенсацию путем деления значения F ^c на интенсивность как донора, так и акцептора. Следовательно, значения FRET выравниваются при более высоких интенсивностях доноров и акцепторов, тогда как они довольно чувствительны при низких интенсивностях доноров и акцепторов.Таким образом, этот метод генерирует значения FRET с высокой стандартной ошибкой (80%), зависящие от концентраций доноров и акцепторов [84].

FRETN = F ^c / G × D _f × A _f

(7)

Обозначения в уравнении (7) аналогичны обозначениям в уравнении (6 ). Константа « G » — это параметр, который связывает потерю донорного сигнала с увеличением сигнала акцептора в результате FRET (см. Уравнения (15) и (16) для « G », что эквивалентно «Α» в разделе ниже).

(c) Метод нормализованного FRET (N _FRET ): чтобы уменьшить несогласованность метода FRETN, Ся и др. Представили процедуру нормализации для F ^c с произведением квадратного корня из сигналов донора и акцептора. [84]. Это делает FRET независимым от локальной концентрации флуорофора. Однако N _FRET по-прежнему не является линейным с изменениями в значениях E и долевой занятости; следовательно, он не подходит для стехиометрических измерений связывающих взаимодействий [85].

Было опубликовано несколько других методов, в которых в основе нормализации значения FRET лежит концентрация акцепторов [81,86].

Экспериментальные результаты, полученные с использованием индексов FRET от разных приборов, несопоставимы, поскольку индексы FRET зависят от параметров системы, таких как интенсивность возбуждения и эффективность обнаружения прибора [21]. Поэтому более уместно выражать FRET через независимый от прибора, но количественный параметр, такой как эффективность FRET.Предполагая, что пара FRET смещена в красную область, что минимизирует автофлуоресценцию [27], а вклад фона незначителен, эффективность FRET можно легко вычислить, решив набор трех линейных уравнений, соответствующих сигналам от образца FRET. Они выражаются как функция от незатушенного донора ( I _D ), эффективности FRET ( E ) и интенсивности от акцептора в отсутствие FRET (I _A ). Для обеспечения единообразия мы используем терминологию, аналогичную той, что использовалась в наших предыдущих статьях [15,68,69,82].Следующие уравнения основаны на FCET [15,68], хотя мы также реализовали его в микроскопии [69,70]. Во-первых, мы хотели бы ввести поправочные коэффициенты, которые требуют отдельных помеченных образцов донора и акцептора, чтобы было легко следовать уравнениям. Поправочные коэффициенты возникают в результате перетекания и перекрестного возбуждения между донорными и акцепторными флуорофорами, поэтому они необходимы для устранения сигналов, отличных от FRET. В общем случае используются четыре различных коэффициента « S », а именно S ₁ , S ₂ , S ₃ и S ₄ .

S ₁ и S ₃ характеризуют перетекание донорной интенсивности на каналы FRET ( I ₂ ) и акцепторного ( I ₃ ) соответственно и являются определяется с использованием только меченого донора образца.

S ₂ и S ₄ характеризуют перетекание акцепторной интенсивности на FRET ( I ₂ ) и донорный ( I ₁ ) каналы соответственно и являются определяется с использованием только меченного акцептором образца.

где I ₁ , I ₂ и I ₃ соответствуют интенсивностям, измеренным в донорном, FRET и акцепторном каналах соответственно. Длина волны возбуждения ( _из ) и излучения ( _из ) для каждой из интенсивностей определена в скобках в уравнениях (11) — (13). Например, сокращение в символе (λ _{ex, D} ; λ _{em, D} ) означает возбуждение на длине волны, соответствующей полосе поглощения донора, и излучение, обнаруженное на длине волны, соответствующей диапазону длин волн излучения донора.Заглавные буквы «D» или «A» в символах обозначают донор и акцептор соответственно.

I1 (λex, D; λem, D) = ID (1 − E) + IA × S4 + ID × E × α × S4S2

(11)

I ₂ (λ _{ex, D} ; λ _{em, A} ) = I _D (1 — E ) × S ₁ + I _A × S ₂ + I _D × E × α

(12)

I3 (λex, A; λem, A) = ID (1 − E) × S3 + IA + ID × E × α × 1S2 × ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA

( 13)

Здесь «ϵ» обозначает молярный коэффициент поглощения молекул «D» и «A», показанный верхними индексами на донорной (λ _{ex, D} ) или акцепторной длинах волн (λ _{ex, A} ).Часто S ₃ , S ₄ и молярный коэффициент поглощения, (ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA) пренебрежимо малы, как и в случае пары FRET Cy3-Cy5 при измерении на FACSCalibur (BD Bioscience, Сан-Хосе, Калифорния, США). Таким образом, решение уравнений (11) — (13) даст «E» в следующей форме (см. Ссылки [15,68] для вывода):

E = I2− I1S1− I3S2α I1 + I2− I1S1− I3S2

(14)

Из приведенного выше набора уравнений также ясно, что для вычисления «E» в ратиометрическом FRET требуется определение коэффициента «α», который имеет широко используется как «G» в микроскопии для коррекции различий в квантовом выходе донора и акцептора и в эффективности обнаружения донора в донорном канале и акцептора в канале FRET.«Α» связывает потерю флуоресценции донора с сенсибилизированным излучением акцептора.

Обычно «α» выражается следующим образом:

где « Q _D » и « Q _A » — квантовые выходы флуоресценции донорного и акцепторного флуорофоров соответственно, а «η _D » и «η _A » — эффективности обнаружения. донора в донорном канале и акцептора в канале FRET соответственно. Поскольку как квантовый выход, так и эффективность обнаружения трудно определить или рассчитать, ранее сообщалось о многочисленных способах расчета фактора «α», хотя и не без проблем, связанных с лежащими в основе переменными.Заинтересованные читатели могут обратиться к цитируемым источникам для изучения различных подходов к определению фактора «α» в микроскопии [21,55,69,70,83,85] и проточной цитометрии [15,55,65,87]. Один из простейших подходов к вычислению «α» основан на маркировке двух отдельных образцов. Один из образцов помечен антителом с донорной меткой, а другой — антителом с меткой акцептора. В таком случае «α» можно рассчитать по следующему уравнению:

α = I2, A I1, D × BD BA × LD LA × ϵλDDϵλDA

(16)

где I _{2, A} и I _{1, D} — интенсивность меченного акцептором образца, измеренная в канале FRET, и интенсивность меченного донором образца, измеренная в донорном канале, соответственно.Аналогичным образом, « B _D » и « B _A » представляют собой среднее количество эпитопов, помеченных конъюгированными с донором и конъюгированными с акцептором антителами, соответственно, и « L _D » и « L _A ”обозначают соотношения мечения (, т. Е. , количество флуорофоров / антитело) конъюгированных с донором и конъюгированных с акцептором антител, соответственно. Для простоты рекомендуется пометить один и тот же эпитоп антителами, конъюгированными с донором и акцептором, так, чтобы B _D = B _A .К сожалению, описанный выше метод требует измерения большого количества клеток, поэтому средние значения интенсивности ( I _{2, A} и I _{1, D} ) могут быть определены надежно, чего трудно достичь в микроскопии. Альтернативно, «α» можно рассчитать, пометив один и тот же мембранный белок двумя неконкурентными антителами, связывающимися с разными эпитопами, но достаточно далеко, чтобы избежать возникновения FRET. Одно из антител должно быть помечено донорской меткой, а другое — конъюгированным с акцептором.Такой подход гарантирует, что отношение B _D / B _A равно 1, поскольку интенсивности I _{2, A} и I _{1, D} измеряются на одних и тех же ячейках. Таким образом, «α» можно легко рассчитать по уравнению (16) с B _D / B _A = 1. Если требование отсутствия FRET не может быть выполнено, передача энергии происходит между донором: и следует принимать во внимание меченные акцептором антитела [55,88].

Несмотря на использование такого систематического метода вычисления «E», удовлетворительные результаты по-прежнему трудно получить для белков с низким уровнем экспрессии. Таким образом, в случаях, когда отношение сигнал / шум очень низкое, для точных расчетов FRET требуется поэтапная коррекция автофлуоресценции и выбор пары FRET с большой длиной волны излучения. Это улучшение уменьшает разброс гистограмм FRET и, таким образом, повышает чувствительность анализа FRET [15,27,69]. Аналогичным образом, мы также недавно ввели эффективный метод, применимый в таких случаях, который называется оценкой максимального правдоподобия (MLE) эффективности FRET.Метод основан на предположении, что детектирование фотонов детекторами следует пуассоновской статистике [63]. Мы разработали вычислительный инструмент, применяя функцию Пуассона к интенсивности I ₂ , выраженной как функция от I ₁ и I ₃ после решения уравнений (11) — (13). Таким образом, метод предсказывает совместную вероятность количества фотонов, полученных донорным, FRET и акцепторным каналами. Представленный алгоритм назначает единственную эффективность FRET на основе вероятности всех трех измеренных значений интенсивности для каждого пикселя.Следовательно, выпадающие пиксели с низкой вероятностью для определенной эффективности FRET можно легко исключить из анализа, что значительно повысит точность расчета. Единственный недостаток состоит в том, что MLE FRET требует набора данных по крайней мере из 100 пикселей, что соответствует области 1 мкм × 1 мкм, предполагая размер пикселя 100 нм, для точного определения эффективности FRET; поэтому попиксельное документирование буквы «E» в изображении невозможно. Однако неоднородность пространственных подмножеств из-за биологической дисперсии может быть исследована, когда интересующие области выбираются для анализа в клетке.При физиологических настройках, которые, как известно, имеют низкое количество фотонов из-за слабой экспрессии белков и обилие внешних пикселей как биологического, так и инструментального происхождения, мы отметили, что эффективность MLE FRET превышает производительность как попиксельного, так и основанного на общей интенсивности FRET. подходы. Традиционный метод вычисления «E» страдает от искажения, вызванного шумом детектора, поэтому при вычислении «E» для слабо экспрессируемых белков преобладают неопределенности. Фактически, гистограмма FRET будет широкой и асимметричной с большой дисперсией, делающей букву E бессмысленной.Читатели, интересующиеся теоретическими и математическими основами этого метода, могут ознакомиться с нашей недавно опубликованной статьей [63]. Метод разработан для конфокального микроскопа; однако мы не видим причин, по которым он не может быть адаптирован для проточной цитометрии до тех пор, пока используются детекторы счета фотонов.

Понимание FRET как инструмента исследования сотовой связи

Измерение FRET, основанное на количественной оценке сенсибилизированного излучения акцептора, является наиболее надежным среди всех методов, основанных на интенсивности.Сенсибилизированное излучение акцептора — это количество излучения акцептора в канале FRET из-за резонансной передачи энергии возбуждения от донора к акцептору [59]. Одновременное измерение излучения индивидуальной флуоресценции от донора и акцептора от одного и того же образца по сравнению с несколькими образцами исключает проблемы, связанные с вариациями, такие как изменения в плотности донора или квантовом выходе флуоресценции [59,68]. Тем не менее, оценки FRET более точны и их легче выполнять в случае, когда эмиссии донора и акцептора хорошо разделены.В противном случае этот метод предполагает введение нескольких поправочных коэффициентов, связанных с перекрестными помехами флуорофора, , т.е. , взаимным возбуждением донора и акцепторов на длине волны возбуждения другого красителя и просачиванием флуоресцентного излучения донора и акцептор к каналу обнаружения, соответствующему другому красителю. Независимые контрольные образцы донора и акцептора могут помочь решить проблемы, связанные с вышеуказанными проблемами. Многочисленные методы были разработаны с целью количественной оценки сенсибилизированного акцепторного сигнала.Хотя количественные подходы, строго определяющие эффективность FRET, являются предпочтительными [53], полуколичественный метод, обеспечивающий неоткалиброванные индексы FRET с сомнительной теоретической базой, также имеется в большом количестве в литературе [59]. Индексы FRET — это относительные значения, зависящие от инструмента, разработанные в соответствии с целями исследований. Они являются качественными по своей природе, однако некоторые из них кажутся более чувствительными и последовательными в тех случаях, когда методы, основанные на эффективности FRET, имеют тенденцию страдать, например, когда отношение донора к акцептору ниже 1 [59].Благодаря простой математической структуре эти подходы могут показаться довольно привлекательными для биологов, которые больше озабочены изучением возможности взаимодействия между двумя макромолекулами в простом формате «да» или «нет» или знанием последствий биологической реакции в ассоциации белки в относительном выражении. Основываясь на литературе, методы измерения сенсибилизированного излучения можно разделить на три группы, основным отличием которых является процесс анализа сигналов FRET: (1) двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения; (2) трехканальное измерение излучения; и (3) спектральный анализ FRET.

Двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения

Двухканальное измерение коэффициента излучения широко применялось как в микроскопии [74,75], так и в проточной цитометрии [76,77] в качестве датчиков белок-белковых взаимодействий. В основном, практика заключается в освещении образца с двойной меткой (донор и акцептор) длиной волны возбуждения донора, а затем сбор сигналов в обоих каналах донора и FRET, , т. Е. ., В диапазоне длин волн, соответствующем пику излучения донор и акцептор соответственно.Индекс FRET, определяемый как отношение интенсивностей флуоресценции в FRET и донорских каналах, широко используется благодаря тому факту, что это соотношение довольно согласовано [19,52,78]. Альтернативное двухканальное измерение отношения возбуждения также было описано ранее, когда измерения на длине волны излучения акцептора проводились при последовательном возбуждении образца FRET с длинами волн донора (канал FRET) и акцептора (канал акцептора). В этом случае параметр, пропорциональный эффективности FRET, выражается как отношение флуоресценции в канале FRET к флуоресценции в акцепторном канале [78,79].В первую очередь, вышеупомянутые методы игнорируют множественные перекрестные помехи и свойства просачивания флуорофоров, такие как прямое возбуждение акцептора на длине волны поглощения донора. Однако эти методы очень полезны до тех пор, пока соотношение концентраций доноров и акцепторов остается постоянным, например, во внутримолекулярных исследованиях FRET [52,54] с использованием FRET-сенсоров.

Трехканальное измерение излучения

Трехканальное измерение излучения требует сбора трех независимых сигналов от одного и того же образца.Эти сигналы различаются либо длиной волны возбуждения, либо спектральным диапазоном регистрируемых детекторов. Фактически, этот метод аналогичен двухканальному измерению с дополнительным третьим каналом, что делает возможными строгие выводы о сигналах, отличных от FRET. Были опубликованы многочисленные исследования, представляющие такую ​​схему с различным уровнем строгости в отношении перекрестных помех или сквозных исправлений [59]. Для трехканального измерения оценка FRET была продемонстрирована как с точки зрения индексов FRET [52,53,80,81], так и эффективности FRET [15,54,68,69,82,83].Измерения требуют сбора сигналов только для донора, только для акцептора и для образцов с двойной (донорно-акцепторной) меткой при одних и тех же обстоятельствах. Ниже мы опишем три наиболее популярных трехканальных измерения на основе индекса FRET с терминологией FRET, используемой соответствующими авторами:

(a) Метод исправленного FRET ( F ^c ): Этот метод был введен Youvan и др. ., для эпифлуоресцентного микроскопа [80]. Они просто генерировали изображение FRET с поправкой на флуоресценцию от фона и проступание.Однако вклад взаимного перекрестного возбуждения в донорных и акцепторных каналах, который в их случае был минимальным, при расчетах не учитывался. Точно так же метод не выполняет нормализацию концентрации доноров и акцепторов. Следовательно, он по своей сути страдает проблемами, связанными с изменчивостью концентрации флуорофора. Фактически, даже при одинаковой эффективности FRET сигнал FRET отличается для образцов, в которых используются различные концентрации доноров и акцепторов.Таким образом, он подходит в условиях, когда концентрация донора к акцептору постоянна или известна заранее. Исправленный FRET выражался в следующей форме:

F ^c = F _f — [( F _d / D _d ) × D _f ] — [( F _a / A _a ) × A _f ]

(6)

В уравнении (6) F , D и A представляют FRET, донорный и акцепторный каналы, соответственно, тогда как индексы « f, d и a представляют собой FRET, донорные и акцепторные образцы соответственно.Спектральное просачивание для донора ( F _d / D _d ) и акцептора ( F _a / A _a ) рассчитывается для образцов только донора и только акцептора соответственно . Также предполагается, что фон из изображений был вычтен в приведенном выше уравнении.

(b) Метод FRET net (FRETN): Gordon et al . представили метод FRETN для преодоления основной проблемы с помощью метода F ^c . F ^c линейно пропорционален концентрации флуорофоров; поэтому они предложили, чтобы уравнение (6) было дополнительно нормировано произведением сигналов донора и акцептора [54]. Этот новый метод, однако, обеспечивает чрезмерную компенсацию путем деления значения F ^c на интенсивность как донора, так и акцептора. Следовательно, значения FRET выравниваются при более высоких интенсивностях доноров и акцепторов, тогда как они довольно чувствительны при низких интенсивностях доноров и акцепторов.Таким образом, этот метод генерирует значения FRET с высокой стандартной ошибкой (80%), зависящие от концентраций доноров и акцепторов [84].

FRETN = F ^c / G × D _f × A _f

(7)

Обозначения в уравнении (7) аналогичны обозначениям в уравнении (6 ). Константа « G » — это параметр, который связывает потерю донорного сигнала с увеличением сигнала акцептора в результате FRET (см. Уравнения (15) и (16) для « G », что эквивалентно «Α» в разделе ниже).

(c) Метод нормализованного FRET (N _FRET ): чтобы уменьшить несогласованность метода FRETN, Ся и др. Представили процедуру нормализации для F ^c с произведением квадратного корня из сигналов донора и акцептора. [84]. Это делает FRET независимым от локальной концентрации флуорофора. Однако N _FRET по-прежнему не является линейным с изменениями в значениях E и долевой занятости; следовательно, он не подходит для стехиометрических измерений связывающих взаимодействий [85].

Было опубликовано несколько других методов, в которых в основе нормализации значения FRET лежит концентрация акцепторов [81,86].

Экспериментальные результаты, полученные с использованием индексов FRET от разных приборов, несопоставимы, поскольку индексы FRET зависят от параметров системы, таких как интенсивность возбуждения и эффективность обнаружения прибора [21]. Поэтому более уместно выражать FRET через независимый от прибора, но количественный параметр, такой как эффективность FRET.Предполагая, что пара FRET смещена в красную область, что минимизирует автофлуоресценцию [27], а вклад фона незначителен, эффективность FRET можно легко вычислить, решив набор трех линейных уравнений, соответствующих сигналам от образца FRET. Они выражаются как функция от незатушенного донора ( I _D ), эффективности FRET ( E ) и интенсивности от акцептора в отсутствие FRET (I _A ). Для обеспечения единообразия мы используем терминологию, аналогичную той, что использовалась в наших предыдущих статьях [15,68,69,82].Следующие уравнения основаны на FCET [15,68], хотя мы также реализовали его в микроскопии [69,70]. Во-первых, мы хотели бы ввести поправочные коэффициенты, которые требуют отдельных помеченных образцов донора и акцептора, чтобы было легко следовать уравнениям. Поправочные коэффициенты возникают в результате перетекания и перекрестного возбуждения между донорными и акцепторными флуорофорами, поэтому они необходимы для устранения сигналов, отличных от FRET. В общем случае используются четыре различных коэффициента « S », а именно S ₁ , S ₂ , S ₃ и S ₄ .

S ₁ и S ₃ характеризуют перетекание донорной интенсивности на каналы FRET ( I ₂ ) и акцепторного ( I ₃ ) соответственно и являются определяется с использованием только меченого донора образца.

S ₂ и S ₄ характеризуют перетекание акцепторной интенсивности на FRET ( I ₂ ) и донорный ( I ₁ ) каналы соответственно и являются определяется с использованием только меченного акцептором образца.

где I ₁ , I ₂ и I ₃ соответствуют интенсивностям, измеренным в донорном, FRET и акцепторном каналах соответственно. Длина волны возбуждения ( _из ) и излучения ( _из ) для каждой из интенсивностей определена в скобках в уравнениях (11) — (13). Например, сокращение в символе (λ _{ex, D} ; λ _{em, D} ) означает возбуждение на длине волны, соответствующей полосе поглощения донора, и излучение, обнаруженное на длине волны, соответствующей диапазону длин волн излучения донора.Заглавные буквы «D» или «A» в символах обозначают донор и акцептор соответственно.

I1 (λex, D; λem, D) = ID (1 − E) + IA × S4 + ID × E × α × S4S2

(11)

I ₂ (λ _{ex, D} ; λ _{em, A} ) = I _D (1 — E ) × S ₁ + I _A × S ₂ + I _D × E × α

(12)

I3 (λex, A; λem, A) = ID (1 − E) × S3 + IA + ID × E × α × 1S2 × ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA

( 13)

Здесь «ϵ» обозначает молярный коэффициент поглощения молекул «D» и «A», показанный верхними индексами на донорной (λ _{ex, D} ) или акцепторной длинах волн (λ _{ex, A} ).Часто S ₃ , S ₄ и молярный коэффициент поглощения, (ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA) пренебрежимо малы, как и в случае пары FRET Cy3-Cy5 при измерении на FACSCalibur (BD Bioscience, Сан-Хосе, Калифорния, США). Таким образом, решение уравнений (11) — (13) даст «E» в следующей форме (см. Ссылки [15,68] для вывода):

E = I2− I1S1− I3S2α I1 + I2− I1S1− I3S2

(14)

Из приведенного выше набора уравнений также ясно, что для вычисления «E» в ратиометрическом FRET требуется определение коэффициента «α», который имеет широко используется как «G» в микроскопии для коррекции различий в квантовом выходе донора и акцептора и в эффективности обнаружения донора в донорном канале и акцептора в канале FRET.«Α» связывает потерю флуоресценции донора с сенсибилизированным излучением акцептора.

Обычно «α» выражается следующим образом:

где « Q _D » и « Q _A » — квантовые выходы флуоресценции донорного и акцепторного флуорофоров соответственно, а «η _D » и «η _A » — эффективности обнаружения. донора в донорном канале и акцептора в канале FRET соответственно. Поскольку как квантовый выход, так и эффективность обнаружения трудно определить или рассчитать, ранее сообщалось о многочисленных способах расчета фактора «α», хотя и не без проблем, связанных с лежащими в основе переменными.Заинтересованные читатели могут обратиться к цитируемым источникам для изучения различных подходов к определению фактора «α» в микроскопии [21,55,69,70,83,85] и проточной цитометрии [15,55,65,87]. Один из простейших подходов к вычислению «α» основан на маркировке двух отдельных образцов. Один из образцов помечен антителом с донорной меткой, а другой — антителом с меткой акцептора. В таком случае «α» можно рассчитать по следующему уравнению:

α = I2, A I1, D × BD BA × LD LA × ϵλDDϵλDA

(16)

где I _{2, A} и I _{1, D} — интенсивность меченного акцептором образца, измеренная в канале FRET, и интенсивность меченного донором образца, измеренная в донорном канале, соответственно.Аналогичным образом, « B _D » и « B _A » представляют собой среднее количество эпитопов, помеченных конъюгированными с донором и конъюгированными с акцептором антителами, соответственно, и « L _D » и « L _A ”обозначают соотношения мечения (, т. Е. , количество флуорофоров / антитело) конъюгированных с донором и конъюгированных с акцептором антител, соответственно. Для простоты рекомендуется пометить один и тот же эпитоп антителами, конъюгированными с донором и акцептором, так, чтобы B _D = B _A .К сожалению, описанный выше метод требует измерения большого количества клеток, поэтому средние значения интенсивности ( I _{2, A} и I _{1, D} ) могут быть определены надежно, чего трудно достичь в микроскопии. Альтернативно, «α» можно рассчитать, пометив один и тот же мембранный белок двумя неконкурентными антителами, связывающимися с разными эпитопами, но достаточно далеко, чтобы избежать возникновения FRET. Одно из антител должно быть помечено донорской меткой, а другое — конъюгированным с акцептором.Такой подход гарантирует, что отношение B _D / B _A равно 1, поскольку интенсивности I _{2, A} и I _{1, D} измеряются на одних и тех же ячейках. Таким образом, «α» можно легко рассчитать по уравнению (16) с B _D / B _A = 1. Если требование отсутствия FRET не может быть выполнено, передача энергии происходит между донором: и следует принимать во внимание меченные акцептором антитела [55,88].

Несмотря на использование такого систематического метода вычисления «E», удовлетворительные результаты по-прежнему трудно получить для белков с низким уровнем экспрессии. Таким образом, в случаях, когда отношение сигнал / шум очень низкое, для точных расчетов FRET требуется поэтапная коррекция автофлуоресценции и выбор пары FRET с большой длиной волны излучения. Это улучшение уменьшает разброс гистограмм FRET и, таким образом, повышает чувствительность анализа FRET [15,27,69]. Аналогичным образом, мы также недавно ввели эффективный метод, применимый в таких случаях, который называется оценкой максимального правдоподобия (MLE) эффективности FRET.Метод основан на предположении, что детектирование фотонов детекторами следует пуассоновской статистике [63]. Мы разработали вычислительный инструмент, применяя функцию Пуассона к интенсивности I ₂ , выраженной как функция от I ₁ и I ₃ после решения уравнений (11) — (13). Таким образом, метод предсказывает совместную вероятность количества фотонов, полученных донорным, FRET и акцепторным каналами. Представленный алгоритм назначает единственную эффективность FRET на основе вероятности всех трех измеренных значений интенсивности для каждого пикселя.Следовательно, выпадающие пиксели с низкой вероятностью для определенной эффективности FRET можно легко исключить из анализа, что значительно повысит точность расчета. Единственный недостаток состоит в том, что MLE FRET требует набора данных по крайней мере из 100 пикселей, что соответствует области 1 мкм × 1 мкм, предполагая размер пикселя 100 нм, для точного определения эффективности FRET; поэтому попиксельное документирование буквы «E» в изображении невозможно. Однако неоднородность пространственных подмножеств из-за биологической дисперсии может быть исследована, когда интересующие области выбираются для анализа в клетке.При физиологических настройках, которые, как известно, имеют низкое количество фотонов из-за слабой экспрессии белков и обилие внешних пикселей как биологического, так и инструментального происхождения, мы отметили, что эффективность MLE FRET превышает производительность как попиксельного, так и основанного на общей интенсивности FRET. подходы. Традиционный метод вычисления «E» страдает от искажения, вызванного шумом детектора, поэтому при вычислении «E» для слабо экспрессируемых белков преобладают неопределенности. Фактически, гистограмма FRET будет широкой и асимметричной с большой дисперсией, делающей букву E бессмысленной.Читатели, интересующиеся теоретическими и математическими основами этого метода, могут ознакомиться с нашей недавно опубликованной статьей [63]. Метод разработан для конфокального микроскопа; однако мы не видим причин, по которым он не может быть адаптирован для проточной цитометрии до тех пор, пока используются детекторы счета фотонов.

Понимание FRET как инструмента исследования сотовой связи

Измерение FRET, основанное на количественной оценке сенсибилизированного излучения акцептора, является наиболее надежным среди всех методов, основанных на интенсивности.Сенсибилизированное излучение акцептора — это количество излучения акцептора в канале FRET из-за резонансной передачи энергии возбуждения от донора к акцептору [59]. Одновременное измерение излучения индивидуальной флуоресценции от донора и акцептора от одного и того же образца по сравнению с несколькими образцами исключает проблемы, связанные с вариациями, такие как изменения в плотности донора или квантовом выходе флуоресценции [59,68]. Тем не менее, оценки FRET более точны и их легче выполнять в случае, когда эмиссии донора и акцептора хорошо разделены.В противном случае этот метод предполагает введение нескольких поправочных коэффициентов, связанных с перекрестными помехами флуорофора, , т.е. , взаимным возбуждением донора и акцепторов на длине волны возбуждения другого красителя и просачиванием флуоресцентного излучения донора и акцептор к каналу обнаружения, соответствующему другому красителю. Независимые контрольные образцы донора и акцептора могут помочь решить проблемы, связанные с вышеуказанными проблемами. Многочисленные методы были разработаны с целью количественной оценки сенсибилизированного акцепторного сигнала.Хотя количественные подходы, строго определяющие эффективность FRET, являются предпочтительными [53], полуколичественный метод, обеспечивающий неоткалиброванные индексы FRET с сомнительной теоретической базой, также имеется в большом количестве в литературе [59]. Индексы FRET — это относительные значения, зависящие от инструмента, разработанные в соответствии с целями исследований. Они являются качественными по своей природе, однако некоторые из них кажутся более чувствительными и последовательными в тех случаях, когда методы, основанные на эффективности FRET, имеют тенденцию страдать, например, когда отношение донора к акцептору ниже 1 [59].Благодаря простой математической структуре эти подходы могут показаться довольно привлекательными для биологов, которые больше озабочены изучением возможности взаимодействия между двумя макромолекулами в простом формате «да» или «нет» или знанием последствий биологической реакции в ассоциации белки в относительном выражении. Основываясь на литературе, методы измерения сенсибилизированного излучения можно разделить на три группы, основным отличием которых является процесс анализа сигналов FRET: (1) двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения; (2) трехканальное измерение излучения; и (3) спектральный анализ FRET.

Двухканальное измерение коэффициента излучения или возбуждения

Двухканальное измерение коэффициента излучения широко применялось как в микроскопии [74,75], так и в проточной цитометрии [76,77] в качестве датчиков белок-белковых взаимодействий. В основном, практика заключается в освещении образца с двойной меткой (донор и акцептор) длиной волны возбуждения донора, а затем сбор сигналов в обоих каналах донора и FRET, , т. Е. ., В диапазоне длин волн, соответствующем пику излучения донор и акцептор соответственно.Индекс FRET, определяемый как отношение интенсивностей флуоресценции в FRET и донорских каналах, широко используется благодаря тому факту, что это соотношение довольно согласовано [19,52,78]. Альтернативное двухканальное измерение отношения возбуждения также было описано ранее, когда измерения на длине волны излучения акцептора проводились при последовательном возбуждении образца FRET с длинами волн донора (канал FRET) и акцептора (канал акцептора). В этом случае параметр, пропорциональный эффективности FRET, выражается как отношение флуоресценции в канале FRET к флуоресценции в акцепторном канале [78,79].В первую очередь, вышеупомянутые методы игнорируют множественные перекрестные помехи и свойства просачивания флуорофоров, такие как прямое возбуждение акцептора на длине волны поглощения донора. Однако эти методы очень полезны до тех пор, пока соотношение концентраций доноров и акцепторов остается постоянным, например, во внутримолекулярных исследованиях FRET [52,54] с использованием FRET-сенсоров.

Трехканальное измерение излучения

Трехканальное измерение излучения требует сбора трех независимых сигналов от одного и того же образца.Эти сигналы различаются либо длиной волны возбуждения, либо спектральным диапазоном регистрируемых детекторов. Фактически, этот метод аналогичен двухканальному измерению с дополнительным третьим каналом, что делает возможными строгие выводы о сигналах, отличных от FRET. Были опубликованы многочисленные исследования, представляющие такую ​​схему с различным уровнем строгости в отношении перекрестных помех или сквозных исправлений [59]. Для трехканального измерения оценка FRET была продемонстрирована как с точки зрения индексов FRET [52,53,80,81], так и эффективности FRET [15,54,68,69,82,83].Измерения требуют сбора сигналов только для донора, только для акцептора и для образцов с двойной (донорно-акцепторной) меткой при одних и тех же обстоятельствах. Ниже мы опишем три наиболее популярных трехканальных измерения на основе индекса FRET с терминологией FRET, используемой соответствующими авторами:

(a) Метод исправленного FRET ( F ^c ): Этот метод был введен Youvan и др. ., для эпифлуоресцентного микроскопа [80]. Они просто генерировали изображение FRET с поправкой на флуоресценцию от фона и проступание.Однако вклад взаимного перекрестного возбуждения в донорных и акцепторных каналах, который в их случае был минимальным, при расчетах не учитывался. Точно так же метод не выполняет нормализацию концентрации доноров и акцепторов. Следовательно, он по своей сути страдает проблемами, связанными с изменчивостью концентрации флуорофора. Фактически, даже при одинаковой эффективности FRET сигнал FRET отличается для образцов, в которых используются различные концентрации доноров и акцепторов.Таким образом, он подходит в условиях, когда концентрация донора к акцептору постоянна или известна заранее. Исправленный FRET выражался в следующей форме:

F ^c = F _f — [( F _d / D _d ) × D _f ] — [( F _a / A _a ) × A _f ]

(6)

В уравнении (6) F , D и A представляют FRET, донорный и акцепторный каналы, соответственно, тогда как индексы « f, d и a представляют собой FRET, донорные и акцепторные образцы соответственно.Спектральное просачивание для донора ( F _d / D _d ) и акцептора ( F _a / A _a ) рассчитывается для образцов только донора и только акцептора соответственно . Также предполагается, что фон из изображений был вычтен в приведенном выше уравнении.

(b) Метод FRET net (FRETN): Gordon et al . представили метод FRETN для преодоления основной проблемы с помощью метода F ^c . F ^c линейно пропорционален концентрации флуорофоров; поэтому они предложили, чтобы уравнение (6) было дополнительно нормировано произведением сигналов донора и акцептора [54]. Этот новый метод, однако, обеспечивает чрезмерную компенсацию путем деления значения F ^c на интенсивность как донора, так и акцептора. Следовательно, значения FRET выравниваются при более высоких интенсивностях доноров и акцепторов, тогда как они довольно чувствительны при низких интенсивностях доноров и акцепторов.Таким образом, этот метод генерирует значения FRET с высокой стандартной ошибкой (80%), зависящие от концентраций доноров и акцепторов [84].

FRETN = F ^c / G × D _f × A _f

(7)

Обозначения в уравнении (7) аналогичны обозначениям в уравнении (6 ). Константа « G » — это параметр, который связывает потерю донорного сигнала с увеличением сигнала акцептора в результате FRET (см. Уравнения (15) и (16) для « G », что эквивалентно «Α» в разделе ниже).

(c) Метод нормализованного FRET (N _FRET ): чтобы уменьшить несогласованность метода FRETN, Ся и др. Представили процедуру нормализации для F ^c с произведением квадратного корня из сигналов донора и акцептора. [84]. Это делает FRET независимым от локальной концентрации флуорофора. Однако N _FRET по-прежнему не является линейным с изменениями в значениях E и долевой занятости; следовательно, он не подходит для стехиометрических измерений связывающих взаимодействий [85].

Было опубликовано несколько других методов, в которых в основе нормализации значения FRET лежит концентрация акцепторов [81,86].

Экспериментальные результаты, полученные с использованием индексов FRET от разных приборов, несопоставимы, поскольку индексы FRET зависят от параметров системы, таких как интенсивность возбуждения и эффективность обнаружения прибора [21]. Поэтому более уместно выражать FRET через независимый от прибора, но количественный параметр, такой как эффективность FRET.Предполагая, что пара FRET смещена в красную область, что минимизирует автофлуоресценцию [27], а вклад фона незначителен, эффективность FRET можно легко вычислить, решив набор трех линейных уравнений, соответствующих сигналам от образца FRET. Они выражаются как функция от незатушенного донора ( I _D ), эффективности FRET ( E ) и интенсивности от акцептора в отсутствие FRET (I _A ). Для обеспечения единообразия мы используем терминологию, аналогичную той, что использовалась в наших предыдущих статьях [15,68,69,82].Следующие уравнения основаны на FCET [15,68], хотя мы также реализовали его в микроскопии [69,70]. Во-первых, мы хотели бы ввести поправочные коэффициенты, которые требуют отдельных помеченных образцов донора и акцептора, чтобы было легко следовать уравнениям. Поправочные коэффициенты возникают в результате перетекания и перекрестного возбуждения между донорными и акцепторными флуорофорами, поэтому они необходимы для устранения сигналов, отличных от FRET. В общем случае используются четыре различных коэффициента « S », а именно S ₁ , S ₂ , S ₃ и S ₄ .

S ₁ и S ₃ характеризуют перетекание донорной интенсивности на каналы FRET ( I ₂ ) и акцепторного ( I ₃ ) соответственно и являются определяется с использованием только меченого донора образца.

S ₂ и S ₄ характеризуют перетекание акцепторной интенсивности на FRET ( I ₂ ) и донорный ( I ₁ ) каналы соответственно и являются определяется с использованием только меченного акцептором образца.

где I ₁ , I ₂ и I ₃ соответствуют интенсивностям, измеренным в донорном, FRET и акцепторном каналах соответственно. Длина волны возбуждения ( _из ) и излучения ( _из ) для каждой из интенсивностей определена в скобках в уравнениях (11) — (13). Например, сокращение в символе (λ _{ex, D} ; λ _{em, D} ) означает возбуждение на длине волны, соответствующей полосе поглощения донора, и излучение, обнаруженное на длине волны, соответствующей диапазону длин волн излучения донора.Заглавные буквы «D» или «A» в символах обозначают донор и акцептор соответственно.

I1 (λex, D; λem, D) = ID (1 − E) + IA × S4 + ID × E × α × S4S2

(11)

I ₂ (λ _{ex, D} ; λ _{em, A} ) = I _D (1 — E ) × S ₁ + I _A × S ₂ + I _D × E × α

(12)

I3 (λex, A; λem, A) = ID (1 − E) × S3 + IA + ID × E × α × 1S2 × ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA

( 13)

Здесь «ϵ» обозначает молярный коэффициент поглощения молекул «D» и «A», показанный верхними индексами на донорной (λ _{ex, D} ) или акцепторной длинах волн (λ _{ex, A} ).Часто S ₃ , S ₄ и молярный коэффициент поглощения, (ϵλAD ϵλDA ϵλDDϵλAA) пренебрежимо малы, как и в случае пары FRET Cy3-Cy5 при измерении на FACSCalibur (BD Bioscience, Сан-Хосе, Калифорния, США). Таким образом, решение уравнений (11) — (13) даст «E» в следующей форме (см. Ссылки [15,68] для вывода):

E = I2− I1S1− I3S2α I1 + I2− I1S1− I3S2

(14)

Из приведенного выше набора уравнений также ясно, что для вычисления «E» в ратиометрическом FRET требуется определение коэффициента «α», который имеет широко используется как «G» в микроскопии для коррекции различий в квантовом выходе донора и акцептора и в эффективности обнаружения донора в донорном канале и акцептора в канале FRET.«Α» связывает потерю флуоресценции донора с сенсибилизированным излучением акцептора.

Обычно «α» выражается следующим образом:

где « Q _D » и « Q _A » — квантовые выходы флуоресценции донорного и акцепторного флуорофоров соответственно, а «η _D » и «η _A » — эффективности обнаружения. донора в донорном канале и акцептора в канале FRET соответственно. Поскольку как квантовый выход, так и эффективность обнаружения трудно определить или рассчитать, ранее сообщалось о многочисленных способах расчета фактора «α», хотя и не без проблем, связанных с лежащими в основе переменными.Заинтересованные читатели могут обратиться к цитируемым источникам для изучения различных подходов к определению фактора «α» в микроскопии [21,55,69,70,83,85] и проточной цитометрии [15,55,65,87]. Один из простейших подходов к вычислению «α» основан на маркировке двух отдельных образцов. Один из образцов помечен антителом с донорной меткой, а другой — антителом с меткой акцептора. В таком случае «α» можно рассчитать по следующему уравнению:

α = I2, A I1, D × BD BA × LD LA × ϵλDDϵλDA

(16)

где I _{2, A} и I _{1, D} — интенсивность меченного акцептором образца, измеренная в канале FRET, и интенсивность меченного донором образца, измеренная в донорном канале, соответственно.Аналогичным образом, « B _D » и « B _A » представляют собой среднее количество эпитопов, помеченных конъюгированными с донором и конъюгированными с акцептором антителами, соответственно, и « L _D » и « L _A ”обозначают соотношения мечения (, т. Е. , количество флуорофоров / антитело) конъюгированных с донором и конъюгированных с акцептором антител, соответственно. Для простоты рекомендуется пометить один и тот же эпитоп антителами, конъюгированными с донором и акцептором, так, чтобы B _D = B _A .К сожалению, описанный выше метод требует измерения большого количества клеток, поэтому средние значения интенсивности ( I _{2, A} и I _{1, D} ) могут быть определены надежно, чего трудно достичь в микроскопии. Альтернативно, «α» можно рассчитать, пометив один и тот же мембранный белок двумя неконкурентными антителами, связывающимися с разными эпитопами, но достаточно далеко, чтобы избежать возникновения FRET. Одно из антител должно быть помечено донорской меткой, а другое — конъюгированным с акцептором.Такой подход гарантирует, что отношение B _D / B _A равно 1, поскольку интенсивности I _{2, A} и I _{1, D} измеряются на одних и тех же ячейках. Таким образом, «α» можно легко рассчитать по уравнению (16) с B _D / B _A = 1. Если требование отсутствия FRET не может быть выполнено, передача энергии происходит между донором: и следует принимать во внимание меченные акцептором антитела [55,88].

Несмотря на использование такого систематического метода вычисления «E», удовлетворительные результаты по-прежнему трудно получить для белков с низким уровнем экспрессии. Таким образом, в случаях, когда отношение сигнал / шум очень низкое, для точных расчетов FRET требуется поэтапная коррекция автофлуоресценции и выбор пары FRET с большой длиной волны излучения. Это улучшение уменьшает разброс гистограмм FRET и, таким образом, повышает чувствительность анализа FRET [15,27,69]. Аналогичным образом, мы также недавно ввели эффективный метод, применимый в таких случаях, который называется оценкой максимального правдоподобия (MLE) эффективности FRET.Метод основан на предположении, что детектирование фотонов детекторами следует пуассоновской статистике [63]. Мы разработали вычислительный инструмент, применяя функцию Пуассона к интенсивности I ₂ , выраженной как функция от I ₁ и I ₃ после решения уравнений (11) — (13). Таким образом, метод предсказывает совместную вероятность количества фотонов, полученных донорным, FRET и акцепторным каналами. Представленный алгоритм назначает единственную эффективность FRET на основе вероятности всех трех измеренных значений интенсивности для каждого пикселя.Следовательно, выпадающие пиксели с низкой вероятностью для определенной эффективности FRET можно легко исключить из анализа, что значительно повысит точность расчета. Единственный недостаток состоит в том, что MLE FRET требует набора данных по крайней мере из 100 пикселей, что соответствует области 1 мкм × 1 мкм, предполагая размер пикселя 100 нм, для точного определения эффективности FRET; поэтому попиксельное документирование буквы «E» в изображении невозможно. Однако неоднородность пространственных подмножеств из-за биологической дисперсии может быть исследована, когда интересующие области выбираются для анализа в клетке.При физиологических настройках, которые, как известно, имеют низкое количество фотонов из-за слабой экспрессии белков и обилие внешних пикселей как биологического, так и инструментального происхождения, мы отметили, что эффективность MLE FRET превышает производительность как попиксельного, так и основанного на общей интенсивности FRET. подходы. Традиционный метод вычисления «E» страдает от искажения, вызванного шумом детектора, поэтому при вычислении «E» для слабо экспрессируемых белков преобладают неопределенности. Фактически, гистограмма FRET будет широкой и асимметричной с большой дисперсией, делающей букву E бессмысленной.Читатели, интересующиеся теоретическими и математическими основами этого метода, могут ознакомиться с нашей недавно опубликованной статьей [63]. Метод разработан для конфокального микроскопа; однако мы не видим причин, по которым он не может быть адаптирован для проточной цитометрии до тех пор, пока используются детекторы счета фотонов.

Интернет-кампус ZEISS Microscopy | Ссылки FRET

Динамическое взаимодействие между белками и другими биомолекулами в живых клетках играет важную роль в широком спектре важных процессов.Хотя эти взаимодействия классически изучаются в флуоресцентной микроскопии с использованием методов совместной локализации, эти взаимодействия могут предоставить дополнительную информацию при применении к флуоресцентным белкам в микроскопии для визуализации живых клеток с использованием методов резонансной передачи энергии. Ссылки, перечисленные ниже, указывают на обзор статей в научной литературе, которые должны стать отличной отправной точкой для исследователей, ищущих информацию о методологии FRET.

Поршень, Д. У. и Кремерс, Г. Дж.

Флуоресцентный белок FRET: хорошее, плохое и уродливое. Тенденции в биохимических науках 32 : 407-414 (2007). Одна из лучших обзорных статей для исследователей, плохо знакомых с методологией резонансной передачи энергии. Авторы обсуждают различные подводные камни, связанные с применением методов FRET для визуализации живых клеток с использованием флуоресцентных белков. Также рассмотрены физические основы FRET и различные подходы к точному измерению FRET.

Фогель, С.С., Талер К. и Кушик С. В.

Причудливый FRET. Наука STKE 331 : re2 (2006). Введение в методы FRET с упором на использование стандартов для определения эффективности FRET в качестве основы для дальнейших исследований. Включено описание физических принципов, окружающих FRET, обсуждение того, как FRET может быть использован для расшифровки межмолекулярных взаимодействий, и обзор задействованных методов. Также описываются точность и интерпретация измерений FRET.

Страйер, Л.

Перенос энергии флуоресценции как спектроскопическая линейка. Ежегодные обзоры биохимии 47 : 819-846 (1978). Эта статья, впервые опубликованная более 30 лет назад, остается одним из краеугольных обзоров теории FRET и ее экспериментального применения. Обсуждаемые темы включают оригинальную теорию Ферстера, измерение эффективности переноса, флуоресцентные реагенты для мечения внутриклеточных структур и примеры применения.

Ву, П.Г. и Бранд, Л.

Резонансный перенос энергии: методы и приложения. Аналитическая биохимия 218 : 1-13 (1994). В этом основополагающем документе рассматриваются практические аспекты методологии FRET. К ним относятся подготовка образцов, определение расстояния, стратегии обнаружения, измерения с временным разрешением и анализ данных.

Ярес-Эриджман, Э.А. и Джовин Т.

FRET визуализация. Nature Biotechnology 21, : 1387-1395 (2003).Возможно, это один из наиболее полных обзоров, когда-либо опубликованных по технологии FRET, этот документ содержит исчерпывающее обсуждение теории, методологии и приложений, начиная от модельных систем и заканчивая отдельными молекулами и визуализацией живых клеток. Статья также включает полезный учебник по фотофизическим явлениям молекул, потенциально участвующих в анализах FRET.

Берни, К. и Данусер, Г.

FRET или без FRET: количественное сравнение. Biophysical Journal 84 : 3992-4010 (2003).В этой обзорной статье, разработанной для обеспечения дорожной карты для количественного сравнения различных методов измерения FRET, предлагается поверхностная система FRET с контролируемыми уровнями донорных и акцепторных флуорофоров на фиксированных расстояниях. Система поддерживается теоретическими расчетами и экспериментальной проверкой в ​​различных условиях.

Bastiaens, P. I.H. и Pepperkok, R.

Наблюдение за белками в их естественной среде обитания: живой клетке. Тенденции в биохимических науках 25 : 631-637 (2000).Отличный обзор применения FRET и связанных с ним методов с использованием флуоресцентных белков в живых клетках. В дополнение к обсуждению FRET и методологии визуализации на протяжении всей жизни (FLIM), в статье также кратко рассматривается восстановление после фотообесцвечивания (FRAP) и корреляционной спектроскопии (FCS), а также многоцветная флуоресцентная визуализация.

Чен, Ю., Миллс, Дж. Д. и Периасами, А.

Локализация белка в живых клетках и тканях с помощью FRET и FLIM. Дифференциация 71 : 528-541 (2003).Сосредоточившись на флуоресцентных белках, в этой статье исследуются различные методы микроскопического освещения, применяемые для измерений FRET, включая широкопольное, конфокальное и многофотонное. Также рассмотрены теория FRET и различные алгоритмы анализа данных, предназначенные для коррекции артефактов, таких как спектральное просвечивание.

Гордон, Г. У., Берри, Г., Лян, X. Х., Левин, Б. и Герман, Б.

Количественные измерения флуоресцентного резонансного переноса энергии с использованием флуоресцентной микроскопии. Biophysical Journal 74 : 2702-2713 (1998). Подробное обсуждение потенциальных артефактов, часто встречающихся при проведении измерений FRET. Среди описанных ловушек — прямое возбуждение акцептора и зависимость FRET от концентрации акцептора. Методология, представленная в этой статье, исправляет перекрестные помехи и зависимость от концентрации. Включены несколько экспериментальных примеров.

Кенуорти, А. К.

Визуализация белок-белковых взаимодействий с помощью флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии. Методы 24 : 289-296 (2001). В этой статье рассматриваются методы определения того, взаимодействуют ли белки, которые колокализованы на уровне световой микроскопии, друг с другом. Вместо флуоресцентных белков в исследуемой системе используется метод акцепторного фотообесцвечивания с использованием синтетических красителей в фиксированных клетках, которые нацелены на плазматическую мембрану.

FRET-биосенсоры на основе аптамеров и наноматериалов: обзор последних достижений (2014–2019)

1.

Qiu X, Hildebrandt N (2015) Быстрый и мультиплексный диагностический анализ микроРНК с использованием квантовых точек на основе резонансной передачи энергии Фёрстера. ACS Nano 9: 8449–8457. https://doi.org/10.1021/acsnano.5b03364

CAS Статья PubMed Google Scholar

2.

He L, Lu D-Q, Liang H et al (2017) Тетраэдрический нанопинцет на основе флуоресцентного резонанса с переносом энергии для высоконадежного обнаружения мРНК, связанной с опухолями, в живых клетках.ACS Nano 11: 4060–4066. https://doi.org/10.1021/acsnano.7b00725

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

3.

Мединц И., Хильдебрандт Н. (2014) FRET — Фёрстеровский резонансный перенос энергии. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co, KGaA, Weinheim

Google Scholar

4.

Клегг Р.М. (1992) [18] Флуоресцентный резонансный перенос энергии и нуклеиновые кислоты.В кн .: Методы энзимологии. Academic Press, pp. 353–388

5.

Rowland CE, Brown CW, Medintz IL, Delehanty JB (2015) Внутриклеточные зонды на основе FRET: обзор. Методы Appl Fluoresc 3: 042006. https://doi.org/10.1088/2050-6120/3/4/042006

CAS Статья PubMed Google Scholar

6.

Хуссейн С.А. (2012) Введение в флуоресцентный резонансный перенос энергии (FRET). В: arXiv.орг. https://arxiv.org/abs/0908.1815

7.

Густ А., Зандер А., Гитл А. и др. (2014) Отправная точка для измерений одиночных молекул на основе флуоресценции в биомолекулярных исследованиях. Molecules 19: 15824–15865. https://doi.org/10.3390/molecules1

824

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

8.

Wen Y, Xing F, He S et al (2010) Флуоресцентный нанозонд на основе графена для обнаружения ионов серебра (i) с использованием оксида графена и серебряного олигонуклеотида.Chem Commun 46: 2596. https://doi.org/10.1039/b2c

CAS Статья Google Scholar

9.

Курт Х., Альпаслан Э., Йилдиз Б. и др. (2017) Конформационно-опосредованный резонансный перенос энергии Ферстера (FRET) в излучающих синий поливинилпирролидон (PVP) -пассивированных наночастицах оксида цинка (ZnO). J Colloid Interface Sci 488: 348–355. https://doi.org/10.1016/j.jcis.2016.11.017

CAS Статья PubMed Google Scholar

10.

Das P, Sedighi A, Krull UJ (2018) Определение биомаркера рака путем резонансной передачи энергии с использованием функциональных флуоресцентных нанозондов. Анальный Чим Acta 1041: 1–24. https://doi.org/10.1016/j.aca.2018.07.060

CAS Статья PubMed Google Scholar

11.

Амири С., Ахмади Р., Салими А. и др. (2018) Сверхчувствительный и высокоселективный аптасенсор FRET для измерения Hg 2+ в образцах рыб с использованием углеродных точек / AuNP в качестве донорной / акцепторной платформы.Новый J Chem 42: 16027–16035. https://doi.org/10.1039/C8NJ02781A

CAS Статья Google Scholar

12.

Кумар YVVA, R RM, A. J et al (2018) Разработка флуоресцентного аптасенсора на основе FRET для обнаружения афлатоксина B1 в загрязненных образцах пищевого зерна. RSC Adv 8: 10465–10473. https://doi.org/10.1039/C8RA00317C

Артикул Google Scholar

13.

Hildebrandt N, Spillmann CM, Algar WR et al (2017) Передача энергии с помощью полупроводниковых биоконъюгатов с квантовыми точками: универсальная платформа для биосенсоров, сбора энергии и других развивающихся приложений. Chem Rev.117: 536–711. https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.6b00030

CAS Статья PubMed Google Scholar

14.

Li Z, He M, Xu D, Liu Z (2014) Системы и датчики акцепторов энергии на основе графеновых материалов.J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 18: 1–17. https://doi.org/10.1016/j.jphotochemrev.2013.10.002

CAS Статья Google Scholar

15.

Гейсслер Д., Линден С., Лирманн К. и др. (2014) Лантаноиды и квантовые точки как агенты передачи энергии резонанса Фёрстера для диагностики и визуализации клеток. Inorg Chem 53: 1824–1838. https://doi.org/10.1021/ic4017883

CAS Статья PubMed Google Scholar

16.

Zu F, Yan F, Bai Z et al (2017) Тушение флуоресценции углеродных точек: обзор механизмов и приложений. Microchim. Acta 184: 1899–1914

CAS Статья Google Scholar

17.

Хан И.М., Чжао С., Ниази С. и др. (2018) Аптасенсор FRET на основе нанокластеров серебра для чувствительного и селективного флуоресцентного обнаружения токсина Т-2. Датчики Актуаторы B Chem 277: 328–335. https://doi.org/10.1016/j.snb.2018.09.021

CAS Статья Google Scholar

18.

Marx V (2017) Зонды: проектирование и оптимизация датчика FRET. Нат Методы 14: 949–953. https://doi.org/10.1038/nmeth.4434

CAS Статья PubMed Google Scholar

19.

Арруэбо М., Валладарес М., Гонсалес-Фернандес Б. (2009) Наночастицы, конъюгированные с антителами, для биомедицинских приложений. J Nanomater 2009: 1-24. https://doi.org/10.1155/2009/439389

CAS Статья Google Scholar

20.

Yüce M, Ullah N, Budak H (2015) Тенденции в методах и применениях выбора аптамеров. Аналитик 140: 5379–5399. https://doi.org/10.1039/C5AN00954E

CAS Статья PubMed Google Scholar

21.

Юсе М., Курт Х (2017) Как создавать нанобиосенсоры: модификация поверхности и характеристика наноматериалов для приложений биосенсоров. RSC Adv 7: 49386–49403. https://doi.org/10.1039/C7RA10479K

Артикул Google Scholar

22.

Малликаратчи П. (2017) Эволюция комплексной мишени SELEX для идентификации аптамеров против антигенов клеточной поверхности млекопитающих. Молекулы 22: 215. https://doi.org/10.3390/molecules22020215

CAS Статья PubMed Central Google Scholar

23.

Sun N, Ding Y, Tao Z et al (2018) Разработка ДНК-зонда с апконверсией флуоресценции для обнаружения ацетамиприда путем разделения магнитных наночастиц.Food Chem 257: 289–294. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.02.148

CAS Статья PubMed Google Scholar

24.

Srinivasan S, Ranganathan V, DeRosa MC, Murari BM (2018) Аптасенсоры без метки, основанные на флуоресцентных скрининговых анализах для обнаружения Salmonella typhimurium. Анальная биохимия 559: 17–23. https://doi.org/10.1016/j.ab.2018.08.002

CAS Статья PubMed Google Scholar

25.

Yüce M, Kurt H, Hussain B, Budak H (2018) Систематическая эволюция лигандов путем экспоненциального обогащения для выбора аптамера. В: Sarmento B, Das NJ (eds) Biomedical Applications of Functionalized Nanomaterials, 1st edn. Elsevier, pp 211–243

26.

Курт Х., Юсе М., Хусейн Б., Будак Х. (2016) Аптасенсор наночастиц и квантовых точек с повышающим преобразованием двойного возбуждения и квантовых точек для множественного обнаружения пищевых патогенов. Biosens Bioelectron 81: 280–286. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.03.005

CAS Статья PubMed Google Scholar

27.

Yüce M, Kurt H, Hussain B et al (2018) Использование стоксовых и антистоксовых профилей излучения люминесцентных нанозондов, функционализированных аптамером, для приложений мультиплексного зондирования. ChemistrySelect 3: 5814–5823. https://doi.org/10.1002/slct.201801008

CAS Статья Google Scholar

28.

Woo H-M, Lee J-M, Yim S, Jeong Y-J (2015) Выделение аптамеров одноцепочечной ДНК, которые отличают подтип h2 гемагглютинина вируса гриппа от H5.PLoS One 10: e0125060. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0125060

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

29.

Ким М., Ум Х. Дж., Банг С. и др. (2009) Удаление мышьяка из подземных вод Вьетнама с использованием мышьяк-связывающего ДНК-аптамера. Environ Sci Technol 43: 9335–9340. https://doi.org/10.1021/es7g

CAS Статья PubMed Google Scholar

30.

Savory N, Lednor D, Tsukakoshi K et al (2013) In silico созревание специфичности связывания ДНК-аптамеров против Proteus mirabilis . Biotechnol Bioeng 110: 2573–2580. https://doi.org/10.1002/bit.24922

CAS Статья PubMed Google Scholar

31.

Li Z, Uzawa T., Tanaka T. et al (2013) Выбор in vitro пептидных аптамеров со сродством к одностенным углеродным нанотрубкам с использованием рибосомного дисплея.Biotechnol Lett. 35: 39–45. https://doi.org/10.1007/s10529-012-1049-6

CAS Статья PubMed Google Scholar

32.

Лим Ю.К., Кузани А.З., Дуан В. (2009) Аспекты проектирования датчиков Aptasensors. В: Коммуникации в компьютерных и информационных науках, стр. 118–127

. Google Scholar

33.

Chandra P, Noh H-B, Won M-S, Shim Y-B (2011) Обнаружение дауномицина с использованием фосфатидилсерина и аптамера, совместно иммобилизованных на наночастицах Au, нанесенных на проводящий полимер.Biosens Bioelectron 26: 4442–4449. https://doi.org/10.1016/j.bios.2011.04.060

CAS Статья PubMed Google Scholar

34.

Чжао В., Чиуман В., Брук М.А., Ли И. (2007) Простые и быстрые колориметрические биосенсоры на основе ДНК-аптамера и несшивающей агрегации наночастиц золота. ChemBioChem 8: 727–731. https://doi.org/10.1002/cbic.200700014

CAS Статья PubMed Google Scholar

35.

Ян С.Дж., Джокуш С., Висенс М. и др. (2005) Эксимерные зонды с переключением света для быстрого мониторинга белков в сложных биологических жидкостях. Proc Natl Acad Sci 102: 17278–17283. https://doi.org/10.1073/pnas.0508821102

CAS Статья PubMed Google Scholar

36.

Khati M (2010) Будущее аптамеров в медицине. Дж. Клин Патол 63: 480–487. https://doi.org/10.1136/jcp.2008.062786

CAS Статья PubMed Google Scholar

37.

Донг Х., Гао В., Ян Ф. и др. (2010) Передача энергии резонанса флуоресценции между квантовыми точками и оксидом графена для восприятия биомолекул. Anal Chem 82: 5511–5517. https://doi.org/10.1021/ac100852z

CAS Статья PubMed Google Scholar

38.

Дарбанди А., Датта Д., Патель К. и др. (2017) Молекулярный маяк, закрепленный на подложке из оксида графена. Нанотехнологии 28: 375501. https://doi.org/10.1088 / 1361-6528 / aa7e50

CAS Статья PubMed Google Scholar

39.

Ghosh S, Datta D, Cheema M et al (2017) Оптическое определение гликированного альбумина на основе аптасенсора для диагностики сахарного диабета. Нанотехнологии 28: 435505. https://doi.org/10.1088/1361-6528/aa893a

CAS Статья PubMed Google Scholar

40.

Li S, Xu L, Ma W et al (2016) Двухрежимная сверхчувствительная количественная оценка микроРНК в живых клетках с помощью хироплазмонных нанопирамид, самоорганизующихся из золота и наночастиц с повышенным преобразованием. J Am Chem Soc 138: 306–312. https://doi.org/10.1021/jacs.5b10309

CAS Статья PubMed Google Scholar

41.

Li M, Zhou X, Guo S, Wu N (2013) Обнаружение свинца (II) с помощью «включаемого» флуоресцентного биосенсора, основанного на передаче энергии от квантовых точек CdSe / ZnS на оксид графена.Biosens Bioelectron 43: 69–74. https://doi.org/10.1016/j.bios.2012.11.039

CAS Статья PubMed Google Scholar

42.

Джин Б., Ван С., Лин М. и др. (2017) Аптасенсор FRET на основе наночастиц с повышающим преобразованием для быстрого и сверхчувствительного обнаружения бактерий. Biosens Bioelectron 90: 525–533. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.10.029

CAS Статья PubMed Google Scholar

43.

Yang W, Zhang G, Weng W et al (2014) Сигнал флуоресцентного биосенсора для MMP-2 на основе FRET между точками полупроводникового полимера и металлоорганическим каркасом. RSC Adv 4: 58852–58857. https://doi.org/10.1039/C4RA12478B

CAS Статья Google Scholar

44.

Ван И, Бао Л., Лю З., Панг Д.-В. (2011) Аптамерный биосенсор, основанный на передаче энергии резонанса флуоресценции от повышающего преобразования фосфора к углеродным наночастицам для обнаружения тромбина в плазме человека.Anal Chem 83: 8130-8137. https://doi.org/10.1021/ac201631b

CAS Статья PubMed Google Scholar

45.

Li X-HH, Sun W-MM, Wu J et al (2018) Сверхчувствительный флуоресцентный аптасенсор для обнаружения карцино-эмбрионального антигена, основанный на передаче резонансной энергии флуоресценции от люминофоров с повышающим преобразованием к наночастицам Au. Анальные методы 10: 1552–1559. https://doi.org/10.1039/C7AY02803B

CAS Статья Google Scholar

46.

Ueno Y, Furukawa K, Tin A, Hibino H (2015) Встроенный FRET-аптасенсор оксида графена: количественная оценка повышенной чувствительности с помощью аптамера с двухцепочечным спейсером ДНК. Anal Sci 31: 875–879. https://doi.org/10.2116/analsci.31.875

CAS Статья PubMed Google Scholar

47.

Jiang H, Ling K, Tao X, Zhang Q (2015) Обнаружение теофиллина в сыворотке с помощью самособирающегося датчика наночастиц золота на основе аптамера РНК.Biosens Bioelectron 70: 299–303. https://doi.org/10.1016/j.bios.2015.03.054

CAS Статья PubMed Google Scholar

48.

Ким Б., Малиутов Д.М., Варшней К.Р., Веллер А. (2017) Труды семинара ICML 2017 года по интерпретируемости человеком в машинном обучении (WHI 2017). Новый J Chem 37: 3998. https://doi.org/10.1039/c3nj00594a

49.

Ахар М.Дж. (2017) Обзор конъюгированных с аптамером наносистем квантовых точек для визуализации рака и тераностики.J Nanomedicine Res 5. https://doi.org/10.15406/jnmr.2017.05.00117

50.

Michalet X (2005) Квантовые точки для живых клеток, визуализация in vivo и диагностика. Наука (80-) 307: 538–544. https://doi.org/10.1126/science.1104274

CAS Статья Google Scholar

51.

Zeng Z, Garoufalis CS, Terzis AF, Baskoutas S (2013) Линейные и нелинейные оптические свойства квантовых точек ядра ZnO / ZnS и ZnS / ZnO: влияние толщины оболочки, примесей и диэлектрической среды.J. Appl Phys 114: 023510. https://doi.org/10.1063/1.4813094

CAS Статья Google Scholar

52.

Васудеван Д., Гаддам Р. Р., Тринчи А., Коул I (2015) Квантовые точки ядро ​​– оболочка: свойства и приложения. Дж. Сплавы. Compd 636: 395–404. https://doi.org/10.1016/j.jallcom.2015.02.102

CAS Статья Google Scholar

53.

Fang B-Y, Wang C-Y, Li C et al (2017) Амплифицировано с использованием ДНКазы I и аптамера / оксида графена для определения специфического антигена простаты в сыворотке крови человека. Датчики Актуаторы B Chem 244: 928–933. https://doi.org/10.1016/j.snb.2017.01.045

CAS Статья Google Scholar

54.

Medintz IL, Uyeda HT, Goldman ER, Mattoussi H (2005) Биоконъюгаты с квантовыми точками для визуализации, маркировки и зондирования. Nat Mater 4: 435–446.https://doi.org/10.1038/nmat1390

CAS Статья PubMed Google Scholar

55.

Zhang C, Ding C, Zhou G et al (2017) Одностадийный синтез функционализированных ДНК квантовых точек без кадмия и его применение для определения белков на основе FRET. Анальный Чим Acta 957: 63–69. https://doi.org/10.1016/j.aca.2016.12.024

CAS Статья PubMed Google Scholar

56.

Арванд М., Миррошандель А.А. (2017) Высокочувствительный аптасенсор на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии между квантовыми точками ZnS, закрытыми l-цистеином, и листами оксида графена для определения фунгицида эдифенфоса. Biosens Bioelectron 96: 324–331. https://doi.org/10.1016/j.bios.2017.05.028

CAS Статья PubMed Google Scholar

57.

Дуан Н., Ву С., Дай С. и др. (2015) Одновременное обнаружение патогенных бактерий с использованием биосенсора на основе аптамера и двойной резонансный перенос энергии флуоресценции от квантовых точек на углеродные наночастицы.Microchim Acta 182: 917–923. https://doi.org/10.1007/s00604-014-1406-3

CAS Статья Google Scholar

58.

Das P, Krull UJ (2017) Обнаружение белка биомаркера рака на модифицированной целлюлозной бумаге флуоресценцией с использованием квантовых точек, связанных аптамером. Аналитик 142: 3132–3135. https://doi.org/10.1039/c7an00624a

CAS Статья PubMed Google Scholar

59.

Sabet FS, Hosseini M, Khabbaz H et al (2017) Аптамерный биосенсор на основе FRET для селективного и чувствительного обнаружения афлатоксина B1 в арахисе и рисе. Food Chem 220: 527–532. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2016.10.004

CAS Статья PubMed Google Scholar

60.

Хильдебрандт Н., Шарбоньер Л.Дж., Бек М. и др. (2005) Квантовые точки как эффективные акцепторы энергии во временном флюороиммуноанализе.Angew Chemie Int Ed. 44: 7612–7615. https://doi.org/10.1002/anie.200501552

CAS Статья Google Scholar

61.

So M-K, Xu C, Loening AM et al (2006) Самосветящиеся конъюгаты квантовых точек для визуализации in vivo. Nat Biotechnol 24: 339–343. https://doi.org/10.1038/nbt1188

CAS Статья PubMed Google Scholar

62.

Doughan S, Uddayasankar U, Krull UJ (2015) Анализ гибридизации нуклеиновых кислот с резонансным переносом энергии на бумаге с использованием наночастиц с повышающим преобразованием в качестве доноров и квантовых точек в качестве акцепторов. Анальный Чим Acta 878: 1–8. https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.04.036

CAS Статья PubMed Google Scholar

63.

Qiu X, Guo J, Jin Z et al (2017) Мультиплексные анализы гибридизации нуклеиновых кислот с использованием настройки расстояния одной пары FRET.Маленький 13: 1700332. https://doi.org/10.1002/smll.201700332

CAS Статья Google Scholar

64.

Qiu X, Guo J, Xu J, Hildebrandt N (2018) Трехмерное мультиплексирование FRET для количественной оценки ДНК с предельными значениями аттомолярного обнаружения. J. Phys Chem Lett. 9: 4379–4384. https://doi.org/10.1021/acs.jpclett.8b01944

CAS Статья PubMed Google Scholar

65.

Qiu X, Xu J, Guo J et al (2018) Расширенная диагностика рака на основе микроРНК с использованием усиленного FRET с временной синхронизацией. Chem Sci 9: 8046–8055. https://doi.org/10.1039/C8SC03121E

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

66.

Guo J, Qiu X, Mingoes C et al (2019) Конформационные детали квантовой точечной ДНК, разрешенные с помощью наноруллера с резонансным переносом энергии Фёрстера. ACS Nano 13: 505–514.https://doi.org/10.1021/acsnano.8b07137

CAS Статья PubMed Google Scholar

67.

Doughan S, Han Y, Uddayasankar U, Krull UJ (2014) Твердофазная ковалентная иммобилизация повышающих преобразование наночастиц для биочувствительности путем резонансной передачи энергии люминесценции. Интерфейсы приложения ACS Mater 6: 14061–14068. https://doi.org/10.1021/am503391m

68.

Li Y, Xu J, Wang L et al (2016) Флуоресцентное обнаружение бисфенола A на основе аптамеров с использованием неконъюгированных наночастиц золота и квантовых точек CdTe.Датчики-приводы, B Chem 222: 815–822. https://doi.org/10.1016/j.snb.2015.08.130

Артикул Google Scholar

69.

Tianyu H, Xu Y, Weidan N, Xingguang S (2016) Анализ агрегации ртути (II) на основе аптамеров с использованием наночастиц золота и флуоресцентных квантовых точек CdTe. Microchim Acta 183: 2131–2137. https://doi.org/10.1007/s00604-016-1831-6

CAS Статья Google Scholar

70.

Lu X, Wang C, Qian J et al (2019) Управляемый мишенью включающий флуоресцентный аптасенсор для определения следов афлатоксина B1 на основе высоко флуоресцентных тройных квантовых точек CdZnTe. Анальный Чим Acta 1047: 163–171. https://doi.org/10.1016/j.aca.2018.10.002

CAS Статья PubMed Google Scholar

71.

Kavosi B, Navaee A, Salimi A (2018) Усиленное определение передачи энергии резонанса флуоресценции простатического специфического антигена на основе агрегации квантовых точек CdTe / антител и аптамера, декорированного дендримером AuNPs-PAMAM.Дж. Люмин 204: 368–374. https://doi.org/10.1016/j.jlumin.2018.08.012

CAS Статья Google Scholar

72.

Lu Z, Chen X, Hu W (2017) Аптасенсор флуоресценции на основе полупроводниковых квантовых точек и нанолистов MoS2 для обнаружения охратоксина А. Датчики Актуаторы B Chem 246: 61–67. https://doi.org/10.1016/j.snb.2017.02.062

CAS Статья Google Scholar

73.

Qiu Z, Shu J, He Y et al (2017) Флуоресцентный аптасенсор на основе квантовых точек CdTe / CdSe с гемин / G-квадруплексным ДНКзимом для чувствительного обнаружения лизоцима с использованием амплификации по катящемуся кругу и гибридизации цепей. Биосенс ​​Биоэлектрон 87: 18–24. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.08.003

CAS Статья PubMed Google Scholar

74.

Lu Z, Chen X, Wang Y et al (2015) Анализ восстановления флуоресценции афлатоксина B1 на основе аптамера с использованием системы гашения, состоящей из квантовых точек и оксида графена.Microchim Acta 182: 571–578. https://doi.org/10.1007/s00604-014-1360-0

CAS Статья Google Scholar

75.

Xiang L, Tang J (2017) QD-аптамер в качестве донора для хемосенсора на основе FRET и оценка сродства между ацетамипридом и его аптамером. RSC Adv 7: 8332–8337. https://doi.org/10.1039/c6ra26118c

CAS Статья Google Scholar

76.

Li Y, Su R, Xu J et al (2018) Стратегия зондирования на основе аптамеров для 17? -Эстрадиола посредством передачи энергии резонанса флуоресценции между противоположно заряженными квантовыми точками CdTe и наночастицами золота. J Nanosci Nanotechnol 18: 1517–1527. https://doi.org/10.1166/jnn.2018.14235

CAS Статья PubMed Google Scholar

77.

Hu W, Chen Q, Li H et al (2016) Изготовление нового безметочного аптасенсора для ацетамиприда путем резонансного переноса энергии флуоресценции между NH 2 -NaYF 4: Yb, Ho @ SiO 2 и наночастицами Au.Biosens Bioelectron 80: 398–404. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.02.001

CAS Статья PubMed Google Scholar

78.

Tu L, Liu X, Wu F, Zhang H (2015) Динамика миграции энергии возбуждения в наноматериалах с повышающим преобразованием. Chem Soc Rev. 44: 1331–1345. https://doi.org/10.1039/c4cs00168k

CAS Статья PubMed Google Scholar

79.

Zhou B, Shi B, Jin D, Liu X (2015) Управление повышающим преобразованием нанокристаллов для новых приложений. Nat. Nanotechnol. 10: 924–936

CAS Статья Google Scholar

80.

Chen H, Guan Y, Wang S et al (2014) Обнаружение включения маркера рака на основе передачи энергии люминесценции в ближнем инфракрасном диапазоне от NaYF ₄ : Yb, Tm / NaGdF ₄ Core –Оболочечное преобразование наночастиц в золотые наностержни. Langmuir 30: 13085–13091.https://doi.org/10.1021/la502753e

CAS Статья PubMed Google Scholar

81.

Li C, Zuo J, Li Q et al (2017) Одностадийный иммуноанализ цельной крови in situ на основе твердых субстратов, основанный на FRET между апконверсией и наночастицами золота. Biosens Bioelectron 92: 335–341. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.11.003

CAS Статья PubMed Google Scholar

82.

Чен Х, Юань Ф, Ван С. и др. (2013) Определение тромбина в красной области на основе аптамеров посредством резонансной передачи энергии флуоресценции между наночастицами NaYF4: Yb, Er с повышающим преобразованием и золотыми наностержнями. Биосенс ​​Биоэлектрон 48: 19–25. https://doi.org/10.1016/j.bios.2013.03.083

CAS Статья PubMed Google Scholar

83.

Hwang S-H, Im S-G, Sung H et al (2014) Резонансный перенос энергии Ферстера на основе наночастиц с повышающим преобразованием для обнаружения последовательности IS6110 комплекса Mycobacterium tuberculosis в мокроте.Biosens Bioelectron 53: 112–116. https://doi.org/10.1016/j.bios.2013.09.011

CAS Статья PubMed Google Scholar

84.

Вилела П., Эль-Сагир А., Миллар TM и др. (2017) Оптические сенсоры на основе наночастиц с повышающим преобразованием оксида графена для целевого обнаружения биомаркеров мРНК, присутствующих при болезни Альцгеймера и раке простаты. Датчики ACS 2: 52–56. https://doi.org/10.1021/acssensors.6b00651

CAS Статья PubMed Google Scholar

85.

Ye WW, Tsang M-K, Liu X et al (2014) Биосенсор на основе передачи энергии резонанса люминесценции с повышающим преобразованием (LRET) для быстрого и сверхчувствительного обнаружения вируса птичьего гриппа подтипа H7. Small 10: 2390–2397. https://doi.org/10.1002/smll.201303766

CAS Статья PubMed Google Scholar

86.

Long Q, Li H, Zhang Y, Yao S (2015) Анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии на основе наночастиц с повышающим преобразованием для фосфорорганических пестицидов.Biosens Bioelectron 68: 168–174. https://doi.org/10.1016/j.bios.2014.12.046

CAS Статья PubMed Google Scholar

87.

Li H, Sun D, ​​Liu Y, Liu Z (2014) Сверхчувствительный гомогенный аптасенсор для канамицина, основанный на передаче резонансной энергии флуоресценции с повышением частоты преобразования. Biosens Bioelectron 55: 149–156. https://doi.org/10.1016/j.bios.2013.11.079

CAS Статья PubMed Google Scholar

88.

Cheng K, Zhang J, Zhang L et al (2017) Аптамерный биосенсор для обнаружения Salmonella typhimurium, основанный на передаче энергии люминесценции от легированного Mn 2+ NaYF 4: Yb, Tm, преобразующего наночастицы в золотые наностержни. Spectrochim Acta Часть A Mol Biomol Spectrosc 171: 168–173. https://doi.org/10.1016/j.saa.2016.08.012

CAS Статья Google Scholar

89.

Hao T, Wu X, Xu L et al (2017) Сверхчувствительное обнаружение простатоспецифического антигена и тромбина на основе пирамид, собранных из наночастиц с повышенным преобразованием золота.Маленький 13: 1603944. https://doi.org/10.1002/smll.201603944

CAS Статья Google Scholar

90.

Qu A, Wu X, Xu L et al (2017) SERS- и люминесцентно-активные тримеры Au – Au – UCNP для аттомолярного обнаружения двух биомаркеров рака. Наномасштаб 9: 3865–3872. https://doi.org/10.1039/C6NR09114H

CAS Статья PubMed Google Scholar

91.

Zhang H, Fang C, Wu S. et al (2015) Аптасенсор на основе резонансного переноса энергии люминесценции с повышением частоты преобразования для чувствительного обнаружения окситетрациклина. Анальная биохимия 489: 44–49. https://doi.org/10.1016/j.ab.2015.08.011

CAS Статья PubMed Google Scholar

92.

Liu Y, Ouyang Q, Li H et al (2018) Включение датчика флуоресценции для Hg 2+ в пищевых продуктах на основе FRET между аптамерными наночастицами с повышающей конверсией и наночастицами золота.J. Agric Food Chem. 66: 6188–6195. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.8b00546

CAS Статья PubMed Google Scholar

93.

Wang Y, Wei Z, Luo X et al (2019) Сверхчувствительный гомогенный аптасенсор для карциноэмбрионального антигена, основанный на передаче резонансной энергии флуоресценции с повышением конверсии. Таланта 195: 33–39. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2018.11.011

CAS Статья PubMed Google Scholar

94.

Wu S, Duan N, Zhang H, Wang Z (2015) Одновременное обнаружение микроцизина-LR и окадаиновой кислоты с использованием аптасенсора с двойным флуоресцентным резонансным переносом энергии. Anal Bioanal Chem. 407: 1303–1312. https://doi.org/10.1007/s00216-014-8378-3

CAS Статья PubMed Google Scholar

95.

Wu Z, Xu E, Jin Z, Irudayaraj J (2018) Сверхчувствительный аптасенсор, основанный на флуоресцентной резонансной передаче энергии и рециклинге мишеней с помощью экзонуклеаз для обнаружения патулина.Food Chem 249: 136–142. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.01.025

CAS Статья PubMed Google Scholar

96.

Li H, Shi L, en SD et al (2016) Биосенсор с резонансным флуоресцентным переносом энергии между наночастицами с повышающим преобразованием и наночастицами палладия для сверхчувствительного обнаружения CEA. Biosens Bioelectron 86: 791–798. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.07.070

CAS Статья PubMed Google Scholar

97.

Dai S, Wu S, Duan N, Wang Z (2016) Аптасенсор на основе резонансного переноса энергии люминесценции для микотоксина охратоксина A с использованием наночастиц повышающего преобразования и золотых наностержней. Microchim Acta 183: 1909–1916. https://doi.org/10.1007/s00604-016-1820-9

CAS Статья Google Scholar

98.

Смит Н.М., Амран С., Розу Ф. и др. (2012) Взаимодействие ртути и тимина с архитектурой G-квадруплекса кресельного типа.Chem Commun 48: 11464. https://doi.org/10.1039/c2cc36481f

CAS Статья Google Scholar

99.

Büning-Pfaue H (2003) Анализ воды в пищевых продуктах методом ближней инфракрасной спектроскопии. Food Chem 82: 107–115. https://doi.org/10.1016/S0308-8146(02)00583-6

CAS Статья Google Scholar

100.

Kong L, Li Y, Ma C et al (2018) Чувствительный иммуноанализ фактора фон Виллебранда, основанный на флуоресцентном резонансном переносе энергии между квантовыми точками графена и наночастицами Ag @ Au.Коллоидные поверхности B Биоинтерфейсы 165: 286–292. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2018.02.049

CAS Статья PubMed Google Scholar

101.

Gao X, Zhang B, Zhang Q et al (2018) Влияние комбинированного режима на структуру и свойства композитов графеновых квантовых точек и порфиринов. Коллоидные поверхности B Биоинтерфейсы 172: 207–212. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2018.08.010

CAS Статья PubMed Google Scholar

102.

He Y, Wen X, Zhang B, Fan Z (2018) Новый аптасенсор для сверхчувствительного обнаружения канамицина на основе одноцепочечного ДНК-связывающего белка с квантовыми точками графеноксида. Датчики-приводы, B Chem 265: 20–26. https://doi.org/10.1016/j.snb.2018.03.029

CAS Статья Google Scholar

103.

Шен Дж., Чжу Й., Ян Х, Ли С. (2012) Квантовые точки графена: возникающие наноленты для биоимиджинга, сенсоров, катализа и фотоэлектрических устройств.Chem Commun 48: 3686. https://doi.org/10.1039/c2cc00110a

CAS Статья Google Scholar

104.

Shi J, Chan C, Pang Y et al (2015) Биосенсор флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) на основе квантовых точек графена (GQD) и наночастиц золота (AuNP) для обнаружения последовательности гена mecA Золотистый стафилококк. Biosens Bioelectron 67: 595–600. https://doi.org/10.1016/j.bios.2014.09.059

CAS Статья PubMed Google Scholar

105.

Шен Дж, Чжу Й, Ян Х и др. (2012) Гидротермальный синтез графенеквантовых точек, поверхностно пассивированных полиэтиленгликолем, и их фотоэлектрическое преобразование в ближнем инфракрасном свете. Новый J Chem 36: 97–101. https://doi.org/10.1039/C1NJ20658C

CAS Статья Google Scholar

106.

Shi J, Lyu J, Tian F, Yang M (2017) Биосенсор включения флуоресценции на основе графеновых квантовых точек (GQD) и нанолистов дисульфида молибдена (MoS2) для обнаружения молекул адгезии эпителиальных клеток (EpCAM). Biosens Bioelectron 93: 182–188. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.09.012

CAS Статья PubMed Google Scholar

107.

Пфайфер Ф., Майер Дж. (2016) Выбор и биосенсорное применение аптамеров для малых молекул.Front Chem 4 (25). https://doi.org/10.3389/fchem.2016.00025

108.

Pfohl-Leszkowicz A, Manderville RA (2007) Охратоксин A: Обзор токсичности и канцерогенности для животных и людей. Mol Nutr Food Res 51: 61–99. https://doi.org/10.1002/mnfr.200600137

Артикул PubMed Google Scholar

109.

Cao L-H, Li H-Y, Xu H et al (2017) Разнообразные структурные преобразования растворение-рекристаллизация и последовательное поведение резонансного переноса энергии Фёрстера люминесцентным пористым Cd-MOF.Дальт Транс 46: 11656–11663. https://doi.org/10.1039/C7DT02697H

CAS Статья Google Scholar

110.

Тиан Дж., Вэй В., Ван Дж и др. (2018) Аптасенсор флуоресцентного резонансного переноса энергии между наноцериями и квантовыми точками графена для определения охратоксина A. Anal Chim Acta 1000: 265–272. https://doi.org/10.1016/j.aca.2017.08.018

CAS Статья PubMed Google Scholar

111.

Cheng X, Cen Y, Xu G et al (2018) Флуорометрическое определение АТФ на основе аптамера путем использования FRET между углеродными точками и оксидом графена. Microchim Acta 185 (144). https://doi.org/10.1007/s00604-018-2683-z

112.

Wu X, Song Y, Yan X et al (2017) Квантовые точки углерода как датчики флуоресцентного резонансного переноса энергии для определения фосфорорганических пестицидов. Biosens Bioelectron 94: 292–297. https://doi.org/10.1016/j.bios.2017.03.010

CAS Статья PubMed Google Scholar

113.

Mohammadi S, Salimi A, Hamd-Ghadareh S et al (2018) Иммуносенсор FRET для чувствительного обнаружения онкомаркера CA 15–3 в образце сыворотки человека и клетках рака груди с использованием функционализированных антителами люминесцентных углеродных точек и аптамера AuNPs-дендример в качестве донорно-акцепторная пара. Анальная биохимия 557: 18–26. https://doi.org/10.1016/j.ab.2018.06.008

CAS Статья PubMed Google Scholar

114.

Zhu S, Song Y, Zhao X et al (2015) Механизм фотолюминесценции в углеродных точках (графеновые квантовые точки, углеродные наноточки и полимерные точки): текущее состояние и перспективы на будущее.Nano Res 8: 355–381

CAS Статья Google Scholar

115.

Wang X, Xu G, Wei F et al (2017) Высокочувствительный и селективный аптасенсор для обнаружения аденозина на основе резонансного переноса энергии флуоресценции от углеродных точек на нанографит. J Colloid Interface Sci 508: 455–461. https://doi.org/10.1016/j.jcis.2017.07.028

CAS Статья PubMed Google Scholar

116.

Zhao Q, Zhou C, Yang Q et al (2019) Флуоресцентный зонд на основе FRET для перекиси водорода, основанный на использовании квантовых точек углерода, сопряженных с нанокластерами золота. Microchim Acta 186 (294). https://doi.org/10.1007/s00604-019-3398-5

117.

Qian ZS, Shan XY, Chai LJ et al (2015) Флуоресцентный наносенсор на основе графеновых квантовых точек — аптамерный зонд и платформа из оксида графена для обнаружения иона свинца (II). Biosens Bioelectron 68: 225–231. https: // doi.org / 10.1016 / j.bios.2014.12.057

CAS Статья PubMed Google Scholar

118.

Saberi Z, Rezaei B, Faroukhpour H, Ensafi AA (2018) Флуорометрический аптасенсор для метамфетамина, основанный на флуоресцентном резонансном переносе энергии с использованием нанолистов оксигидроксида кобальта и углеродных точек. Microchim Acta 185: 303. https://doi.org/10.1007/s00604-018-2842-2

CAS Статья Google Scholar

119.

Shen X, Xu L, Zhu W et al (2017) Включающий флуоресцентный аптасенсор на основе углеродных точек для чувствительного обнаружения аденозина. New J Chem 41: 9230–9235. https://doi.org/10.1039/C7NJ02384G

CAS Статья Google Scholar

120.

Xu M, Gao Z, Zhou Q et al (2016) Углеродные точки, координированные с ионами тербия, для флуоресцентного аптасенсинга аденозин-5′-трифосфата с немодифицированными наночастицами золота. Biosens Bioelectron 86: 978–984.https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.07.105

CAS Статья PubMed Google Scholar

121.

Zhu L, Xu G, Song Q et al (2016) Высокочувствительное определение дофамина с помощью включаемого флуоресцентного биосенсора на основе углеродных точек, меченных аптамером, и нанографита. Датчики Актуаторы B Chem 231: 506–512. https://doi.org/10.1016/j.snb.2016.03.084

CAS Статья Google Scholar

122.

Ван Б., Чен И., Ву И и др. (2016) Аптамер индуцировал сборку флуоресцентных углеродных точек, допированных азотом, на наночастицах золота для чувствительного обнаружения AFB 1. Biosens Bioelectron 78: 23–30. https://doi.org/10.1016/j.bios.2015.11.015

CAS Статья PubMed Google Scholar

123.

Ван И, Ма Т., Ма С. и др. (2017) Флуорометрическое определение антибиотика канамицина с помощью аптамер-индуцированного гашения FRET и восстановления между нанолистами MoS2 и углеродными точками.Microchim Acta 184: 203–210. https://doi.org/10.1007/s00604-016-2011-4

CAS Статья Google Scholar

124.

Zhu X, Zheng H, Wei X et al (2013) Металлоорганический каркас (MOF): новая сенсорная платформа для биомолекул. Chem Commun 49: 1276. https://doi.org/10.1039/c2cc36661d

CAS Статья Google Scholar

125.

McKinlay AC, Morris RE, Horcajada P et al (2010) BioMOFs: металл-органические основы для биологических и медицинских приложений. Angew Chemie Int Ed 49: 6260–6266. https://doi.org/10.1002/anie.201000048

CAS Статья Google Scholar

126.

Ма Д., Ван В., Ли Й и др. (2010) Синтез 2,5-пиразиндикарбоксилатных и оксалатных лигандов in situ, приводящий к микропористому европий-органическому каркасу, способному селективно воспринимать небольшие молекулы.CrystEngComm 12: 4372. https://doi.org/10.1039/c0ce00135j

CAS Статья Google Scholar

127.

Qu F, Sun C, Lv X, You J (2018) Металлоорганический каркас на основе тербия и система наночастиц золота в качестве флуорометрического зонда для определения аденозинтрифосфата на основе аптамера. Микрохим Акта 185: 359. https://doi.org/10.1007/s00604-018-2888-1

CAS Статья PubMed Google Scholar

128.

Ли Дж., Ким Дж., Ким С., Мин Д.Х. (2016) Биосенсоры на основе оксида графена и их биомедицинское применение. Adv. Препарат Делив. Ред. 105: 275–287

CAS Статья Google Scholar

129.

Zou W, Gong F, Gu T et al (2018) Эффективная стратегия определения пирофосфата на основе богатых азотом квантовых точек в сочетании с оксидом графена. Microchem J 141: 466–472. https://doi.org/10.1016/j.microc.2018.06.004

CAS Статья Google Scholar

130.

Dhiman A, Kalra P, Bansal V et al (2017) Диагностические платформы для точек оказания помощи на основе аптамеров. Датчики Актуаторы, B Chem. 246: 535–553

CAS Статья Google Scholar

131.

Lee J, Samson AAS, Yim Y et al (2019) Анализ FRET для количественного определения ингибиторов экзонуклеазы EcoRV с использованием пергаментной бумаги, напечатанной струйной печатью с оксидом графена и ДНК, меченной FAM. Microchim Acta 186 (211). https://doi.org/10.1007/s00604-019-3317-9

132.

Алонсо-Кристобаль П., Вилела П., Эль-Сагир А. и др. (2015) Высокочувствительный датчик ДНК на основе наночастиц с повышающим преобразованием и оксида графена. Интерфейсы приложения ACS Mater 7: 12422–12429. https://doi.org/10.1021/am507591u

CAS Статья PubMed Google Scholar

133.

Фурукава К., Уэно Ю., Такамура М., Хибино Х. (2016) Graphene FRET Aptasensor. Датчики ACS 1: 710–716. https://doi.org/10.1021/acssensors.6b00191

CAS Статья Google Scholar

134.

Tian F, Lyu J, Shi J, Yang M (2017) Анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) на основе графена и графеноподобных материалов с двумя деноминациями для биологических применений. Биосенс ​​Биоэлектрон 89: 123–135. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.06.046

CAS Статья PubMed Google Scholar

135.

Гарсия-Каньяс В., Симо К., Эрреро М. и др. (2012) Настоящие и будущие проблемы анализа пищевых продуктов: Foodomics. Anal Chem 84: 10150-10159. https://doi.org/10.1021/ac301680q

CAS Статья PubMed Google Scholar

136.

Арнольд С.М., Кларк К.Э., Staples CA и др. (2013) Актуальность питьевой воды как источника воздействия бисфенола на человека A. J Expo Sci Environ Epidemiol 23: 137–144. https: // doi.org / 10.1038 / jes.2012.66

CAS Статья PubMed Google Scholar

137.

Zhu Y, Cai Y, Xu L et al (2015) Создание FRET биосенсора аптамер / оксид графена для одноэтапного обнаружения бисфенола A. Интерфейсы ACS Appl Mater 7: 7492–7496. https://doi.org/10.1021/acsami.5b00199

CAS Статья PubMed Google Scholar

138.

Zhang H, Zhang H, Aldalbahi A et al (2017) Флуоресцентные биосенсоры на основе графена и оксида графена. Биосенс ​​Биоэлектрон 89: 96–106. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.07.030

CAS Статья PubMed Google Scholar

139.

Zhou ZM, Zhou J, Chen J et al (2014) Обнаружение карцино-эмбрионального антигена на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии между квантовыми точками и оксидом графена.Биосенс ​​Биоэлектрон 59: 397–403. https://doi.org/10.1016/j.bios.2014.04.002

CAS Статья PubMed Google Scholar

140.

Kenry GA, Zhang X et al (2016) Высокочувствительное и селективное флуоресцентное определение малярийного биомаркера на основе аптамеров с использованием однослойных MoS2Nanosheets. Датчики ACS 1: 1315–1321. https://doi.org/10.1021/acssensors.6b00449

CAS Статья Google Scholar

141.

Сингх П., Гупта Р., Синха М. и др. (2016) Платформа цифрового ответа на основе MoS2 для флуоресцентного обнаружения патогенов на основе аптамера. Microchim Acta 183: 1501–1506. https://doi.org/10.1007/s00604-016-1762-2

CAS Статья Google Scholar

142.

Yuan Y, Li R, Liu Z (2014) Создание водорастворимого слоистого нанолиста WS ₂ в качестве платформы для биосенсоров. Anal Chem 86: 3610–3615. https: // doi.org / 10.1021 / ac5002096

CAS Статья PubMed Google Scholar

143.

Zhang Y, Zheng B, Zhu C et al (2015) Наносенсоры на основе однослойных дихалькогенидов переходных металлов на основе нанолистов для быстрого, чувствительного и мультиплексного обнаружения ДНК. Adv Mater 27: 935–939. https://doi.org/10.1002/adma.201404568

CAS Статья PubMed Google Scholar

144.

Ge J, Ou E-C, Yu R-Q, Chu X (2014) Новый аптамерный нанобиосенсор, основанный на архитектуре самособирающихся нанолистов ДНК-MoS 2 для обнаружения биомолекул. J Mater Chem B 2: 625–628. https://doi.org/10.1039/C3TB21570A

CAS Статья PubMed Google Scholar

145.

Cui F, Ji J, Sun J et al (2019) Новый магнитно-флуоресцентный биосенсор на основе графеновых квантовых точек для быстрого, эффективного и чувствительного разделения и обнаружения циркулирующих опухолевых клеток.Anal Bioanal Chem 411: 985–995. https://doi.org/10.1007/s00216-018-1501-0

CAS Статья PubMed Google Scholar

146.

Gao L, Li Q, Deng Z et al (2017) Высокочувствительное определение белка с помощью ковалентно связанного аптамера с MoS2 и стратегии амплификации с помощью экзонуклеаз. Int J Nanomedicine 12: 7847–7853. https://doi.org/10.2147/IJN.S145585

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

147.

Jia L, Ding L, Tian J et al (2015) Нанопластинки MoS 2, загруженные аптамером, в качестве нанозондов для обнаружения внутриклеточного АТФ и контролируемой фотодинамической терапии. Наномасштаб 7: 15953–15961. https://doi.org/10.1039/C5NR02224J

CAS Статья PubMed Google Scholar

148.

Равикумар А., Паннеерсельвам П., Радхакришнан К. и др. (2018) Нанолисты MoS 2 в качестве эффективного флуоресцентного тушителя для последовательного обнаружения ионов мышьяка в водной системе.Appl Surf Sci 449: 31–38. https://doi.org/10.1016/j.apsusc.2017.12.098

CAS Статья Google Scholar

149.

Xu S, Feng X, Gao T et al (2017) Аптамер индуцировал разноцветный Au NCs-MoS 2 «включающий» флуоресцентный биосенсор с резонансным переносом энергии для двухцветного одновременного обнаружения множества опухолевых маркеров с помощью возбуждения с одной длиной волны. Анальный Чим Acta 983: 173–180. https://doi.org/10.1016/j.aca.2017.06.023

CAS Статья PubMed Google Scholar

150.

Chen J, Li Y, Huang Y et al (2019) Флуорометрический анализ дофамина, основанный на системе передачи энергии, состоящей из квантовых точек MoS2, функционализированных аптамером, и нанолистов MoS2. Microchim Acta 186 (58). https://doi.org/10.1007/s00604-018-3143-5

151.

Эстебан-Фернандес де Авила Б., Лопес-Рамирес М.А., Баес Д.Ф. и др. (2016) Каталитические микродвигатели на основе графена, модифицированные аптамером: выключено – включено флуоресцентное обнаружение рицина.Датчики ACS 1: 217–221. https://doi.org/10.1021/acssensors.5b00300

CAS Статья Google Scholar

152.

Guo H, Li J, Li Y et al (2018) Включаемый флуоресцентный датчик для обнаружения Hg 2+ на основе оксида графена и аптамеров ДНК. New J Chem 42: 11147–11152. https://doi.org/10.1039/C8NJ01709C

CAS Статья Google Scholar

153.

Zhang J, Li Z, Zhao S, Lu Y (2016) Зависимая от размера модуляция взаимодействий оксид графена-аптамер для детектирования афлатоксина B 1 на основе усиленной флуоресценции с настраиваемым динамическим диапазоном. Аналитик 141: 4029–4034. https://doi.org/10.1039/C6AN00368K

CAS Статья PubMed Google Scholar

154.

Qin J, Cui X, Wu P et al (2017) Анализ флуоресцентного сенсора на β-лактамазу в молоке на основе комбинации аптамера и оксида графена.Food Control 73: 726–733. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2016.09.023

CAS Статья Google Scholar

155.

Ha N, Jung I-P, La I et al (2017) Сверхчувствительное обнаружение канамицина для обеспечения безопасности пищевых продуктов с использованием флуоресцентного аптасенсора на основе восстановленного оксида графена. Sci Rep 7 (40305). https://doi.org/10.1038/srep40305

156.

Weng X, Neethirajan S (2016) Микрожидкостный биосенсор, использующий оксид графена и функционализированные аптамером квантовые точки для обнаружения аллергена арахиса.Biosens Bioelectron 85: 649–656. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.05.072

CAS Статья PubMed Google Scholar

157.

Sui N, Wang L, Xie F et al (2016) Сверхчувствительный анализ тромбина на основе аптамеров, основанный на усиленной металлом резонансной передаче энергии флуоресценции. Microchim Acta 183: 1563–1570. https://doi.org/10.1007/s00604-016-1774-y

CAS Статья Google Scholar

158.

Persson BNJ, Lang ND (1982) Электронно-дырочное тушение возбужденных состояний вблизи металла. Phys Rev B 26: 5409–5415. https://doi.org/10.1103/PhysRevB.26.5409

CAS Статья Google Scholar

159.

Chen C, Midelet C, Bhuckory S. et al (2018) Наноповерхностная передача энергии от долгоживущих доноров тербия к золотым наночастицам. J. Phys Chem. C 122: 17566–17574. https://doi.org/10.1021/acs.jpcc.8b06539

CAS Статья Google Scholar

160.

Дженнингс Т.Л., Сингх М.П., ​​Страус Г.Ф. (2006) Флуоресцентное гашение на время жизни вблизи d = 1,5 нм Золотые наночастицы: проверка достоверности NSET. J Am Chem Soc 128: 5462–5467. https://doi.org/10.1021/ja0583665

CAS Статья PubMed Google Scholar

161.

Li G, Zeng J, Liu H et al (2019) Флуорометрический аптамерный нанозонд для альфа-фетопротеина, использующий FRET между 5-карбоксифлуоресцеином и наночастицами палладия.Microchim Acta 186 (314). https://doi.org/10.1007/s00604-019-3403-z

162.

Holzinger M, Le Goff A, Cosnier S (2014) Наноматериалы для биосенсорных приложений: обзор. Front Chem 2: 1–10. https://doi.org/10.3389/fchem.2014.00063

CAS Статья Google Scholar

163.

Abouna GM (2004) Использование маргинальных-субоптимальных донорских органов: практическое решение проблемы нехватки органов.Энн Трансплант 9: 62–66. https://doi.org/10.1021/cm020732l

164.

Yuan F, Chen H, Xu J et al (2014) Передача энергии люминесценции на основе аптамеров от ближней инфракрасной области к ближней инфракрасной области, преобразующей наночастицы в золотые наностержни, и ее применение для обнаружения тромбина. Chem — A Eur J 20: 2888–2894. https://doi.org/10.1002/chem.201304556

CAS Статья Google Scholar

165.

Xing H, Wei T, Lin X, Dai Z (2018) MnCuInS / ZnS @ BSA в ближнем инфракрасном диапазоне и наночастица Au, подобная ежу, как новая донорно-акцепторная пара для улучшенного биочувствительности FRET. Анальный Чим Acta 1042: 71–78. https://doi.org/10.1016/j.aca.2018.05.048

CAS Статья PubMed Google Scholar

166.

Zhang R, Sun J, Ji J et al (2019) Новый биосенсор «OFF-ON», основанный на наноповерхностном переносе энергии между золотыми нанокрестами и графеновыми квантовыми точками для внутриклеточного зондирования и отслеживания АТФ.Датчики-приводы, B Chem 282: 910–916. https://doi.org/10.1016/j.snb.2018.11.141

CAS Статья Google Scholar

167.

Qaddare SH, Salimi A (2017) Усиленное флуоресцентное зондирование ДНК с использованием люминесцентных углеродных точек и AuNP / GO в качестве сенсорной платформы: новое сочетание FRET и гибридизации ДНК для обнаружения гомогенного гена ВИЧ-1 на фемтомолярном уровне . Biosens Bioelectron 89: 773–780. https: // doi.org / 10.1016 / j.bios.2016.10.033

CAS Статья PubMed Google Scholar

168.

Wang Y, Gan N, Zhou Y et al (2017) Новый переключатель флуоресцентного аптамера с одноцепочечной ДНК, связывающий белок, на основе FRET для гомогенного обнаружения антибиотиков. Biosens Bioelectron 87: 508–513. https://doi.org/10.1016/j.bios.2016.08.107

CAS Статья PubMed Google Scholar

169.

Yu M, Wang H, Fu F et al (2017) Платформа на основе резонансной передачи энергии Фёрстера с двойным распознаванием для одноэтапного чувствительного обнаружения патогенных бактерий с использованием флуоресцентных нанокластеров ванкомицин-золото и наночастиц аптамер-золото. Anal Chem 89: 4085-4090. https://doi.org/10.1021/acs.analchem.6b04958

CAS Статья PubMed Google Scholar

170.

Han Z, Chen L, Weng Q et al (2018) Структура ядра / оболочки тройных квантовых точек @ CdSeTe из золота с кремнеземным покрытием для детектирования флуоресценции и двухмодальной визуализации.Датчики Актуаторы B Chem 258: 508–516. https://doi.org/10.1016/j.snb.2017.11.157

CAS Статья Google Scholar

171.

Ye T, Peng Y, Yuan M et al (2019) «включающий» флуорометрический анализ для обнаружения канамицина с использованием нанокластеров серебра и передачи энергии, усиленной поверхностным плазмоном. Microchim Acta 186 (40). https://doi.org/10.1007/s00604-018-3161-3

172.

Léger C, Di Meo T, Aumont-Nicaise M et al (2019) Индуцированный лигандом конформационный переключатель в искусственном каркасе бидоменного белка. Sci Rep 9 (1178). https://doi.org/10.1038/s41598-018-37256-5

173.

Wu Y-T, Qiu X, Lindbo S. et al (2018) Квантовый иммуноферментный анализ FRET для HER2 с использованием сверхмалых аффинных белков. Маленький 14: 1802266. https://doi.org/10.1002/smll.201802266

CAS Статья Google Scholar

Флуоресцентный резонансный перенос энергии — Литература

Обзор раздела:

Понимание динамических взаимодействий между белками в живых клетках является фундаментальным для базовых знаний основных концепций, лежащих в основе молекулярной и клеточной биологии.За последние несколько лет быстрое развитие флуоресцентных белков и их применение в качестве продуктов слияния и биосенсоров значительно расширило молекулярный инструментарий, доступный для исследования тайн клеточной физиологии и патологии. В связи с этим флуоресцентный (или Фёрстеровский) резонансный перенос энергии ( FRET ) становится мощным методом оптической микроскопии для исследования физиологических процессов с высоким временным и пространственным разрешением. Ссылки, перечисленные ниже, выделяют важные литературные источники для обзорных статей и оригинальных исследовательских отчетов по созданию и применению флуоресцентных белков в экспериментах по резонансному переносу энергии.

Источники литературы

• Bacskai, BJ, Hochner, B., Mahaut-Smith, M., Adams, SR, Kaang, BK, Kandel, ER, and Tsien, RY, Пространственно разрешенная динамика цАМФ и протеинкиназы A субъединицы в сенсорных нейронах аплизии ., Science 260: 222-226 (1993). | PubMed |
• Bastiaens, P. I.H. и Jovin, T. M., Микроскопия флуоресцентного резонансного переноса энергии ., В Cell Biology: A Laboratory Handbook, Volume 3 , Celis, J.E. (ред.), Academic Press, Нью-Йорк, страницы 136-146 (1998). | Amazon |
• Bastiaens, PIH, Majoul, IV, Verveer, PJ, Soeling, HD, and Jovin, TM, Визуализация внутриклеточного движения и состояния четвертичной структуры AB5 токсина холеры ., The EMBO Journal 15: 4246-4253 (1996). | PubMed |
• Bastiaens, P. I.H. и Pepperkok, R., Наблюдение за белками в их естественной среде обитания: живая клетка ., Тенденции в биохимических науках 25: 631-637 (2000). | PubMed |
• Berland, KM, Количественная оценка молекулярных взаимодействий с помощью флуоресцентной корреляционной спектроскопии ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, New York , страницы 272-283 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Berney, C. и Danuser, G., FRET или No FRET: количественное сравнение ., Biophysical Journal 84: 3992-4010 (2003). | PubMed |
• Botts, J., Takashi, R., Torgerson, P., Hozumi, T., Muhlrad, A., Mornet, D., and Morales, MF, О механизме передачи энергии в субфрагменте миозина 1 ., Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 81: 2060-2064 (1984). | PubMed |
• Кардулло Р. А., Мунгавон Р. М. и Вольф Д. Э., Организация и динамика визуализации мембран ., в Биофизические и биохимические аспекты флуоресцентной спектроскопии , Dewey, T. G. (ed.), Springer, New York, pages 231-260 (1991). | Amazon |
• Кардулло Р. А. и Парпура В., Флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии: теория и приборы ., Методы в клеточной биологии 72: 415-430 (2003). | PubMed |
• Чентонзе В. Э., Сан М., Масуда А., Герритсен Х. и Герман Б., Флуоресцентная микроскопия с резонансным переносом энергии, визуализирующая ., Методы в энзимологии 360: 542-560 (2003). | Методы в энзимологии |
• Chan, FK-M., Siegel, RM, Zacharias, D., Swofford, R., Holmes, KL, Tsien, RY, and Lenardo, MJ, Анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии взаимодействий рецепторов на поверхности клеток и передачи сигналов с использованием спектральных вариантов зеленого флуоресцентного белка ., Cytometry 44: 361-368 (2001). | PubMed |
• Chen, Y., Elangovan, M., and Periasamy, A., Анализ данных FRET: алгоритм ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 126–145 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Chen, Y., Mills, J. D., and Periasamy, A., Локализация белка в живых клетках и тканях с использованием FRET и FLIM ., Differentiation 71: 528-541 (2003). | PubMed |
• Chen, Y. и Periasamy, A., Характеристика микроскопии визуализации времени жизни флуоресценции с двухфотонным возбуждением для определения локализации белка ., Microscopy Research and Technique 63: 72-80 (2004). | PubMed |
• Chen, Y. and Periasamy, A., Визуализация времени жизни флуоресценции с коррелированным временем однофотонным счетом — FRET-микроскопия для локализации белка ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, 239–259 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Clegg, RM, флуоресцентный резонансный перенос энергии ., В Fluorescence Imaging Spectroscopy and Microscopy , Wang, XF and Herman, B. (ред.), John Wiley and Sons, Inc., Нью-Йорк, страницы 179-252 (1996). | Amazon |
• Clegg, R.M., Флуоресцентный резонансный перенос энергии и нуклеиновые кислоты ., Способы в энзимологии 211: 353-388 (1992). | Методы в энзимологии |
• Day, R. N., Визуализация взаимодействий фактора транскрипции Pit-1 в ядре живой клетки с помощью флуоресцентной микроскопии с резонансным переносом энергии ., Molecular Endocrinology 12: 1410-1419 (1998). | PubMed |
• Day, R. N., Nordeen, S. K. и Wan, Y., Визуализация белок-белковых взаимодействий в ядре живой клетки ., Molecular Endocrinology 13: 517-526 (1999). | PubMed |
• Day, R. N., Periasamy, A., and Schaufele, F., Микроскопия флуоресцентного резонансного переноса энергии локализованных взаимодействий белков в ядре живой клетки ., Methods 25: 4-18 (2001). | PubMed |
• Дэй, Р. Н. и Пистон, Д. У., Слежка за скрытыми жизнями белков ., Nature Biotechnology 17: 425-426 (1999). | PubMed |
• Дердовски, А., Ding, L., and Spearman, P., Новый анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии демонстрирует, что домен Pr55Gag I вируса иммунодефицита человека типа 1 опосредует взаимодействия Gag-Gag ., Journal of Virology 78: 1230- 1242 (2004). | PubMed |
• Доманов Ю.А. и Горбенко Г.П., Анализ резонансной передачи энергии в модельных мембранах: роль ориентационных эффектов ., Биофизическая химия 99: 143-154 (2002). | PubMed |
• Dos Remedios, C. G. и Moens, P. D. J., Флуоресцентная резонансная спектроскопия переноса энергии является надежным «правителем» для измерения структурных изменений в белках ., Journal of Structural Biology 115: 175-185 (1995). | PubMed |
• Элангован М., Дэй Р. Н. и Периасами А., Наносекундная флуоресцентная резонансная передача энергии — визуализация времени жизни флуоресценции для локализации взаимодействия белков в отдельной живой клетке ., Journal of Microscopy 205: 3-14 (2002). | PubMed |
• Элангован М., Дэй Р. Н. и Периасами А., Динамическая визуализация с использованием флуоресцентного резонансного переноса энергии ., BioTechniques 32: 1260-1265 (2002). | PubMed |
• Элангован, М., Валлраб, Х., Чен, Ю., Дэй, Р. Н., Баррозу, М., и Периасами, А., Характеристика микроскопии с одно- или двухфотонным возбуждением флуоресцентного резонансного переноса энергии ., Методы 29: 58-73 (2003). | PubMed |
• Эриксон М.Г., Мун Д.Л. и Юэ Д.Т., DsRed как потенциальный партнер FRET с CFP и GFP ., Biophysical Journal 85: 599-611 (2003). | PubMed |
• Фер, М., Окумото, С., Дойшл, К., Лагер, И., Лугер, Л.Л., Перссон, Дж., Кожух, Л., Лалонд, С., и Фроммер, В.Б., Разработка и использование флуоресцентных наносенсоров для визуализации метаболитов в живых клетках ., Biochemical Society Transactions 33: 287-290 (2005). | PubMed |
• Forde, TS и Hanley, QS, После FRET через пять этапов передачи энергии: спектроскопическое фотообесцвечивание, восстановление спектров и последовательный механизм FRET ., Photochemical and Photobiological Sciences 4: 609-616 ( 2005). | PubMed |
• Förster, T., Межмолекулярная миграция энергии и флуоресценция ., Annalen der Physik (Лейпциг) 2: 55-75 (1948). | Энн Физ |
• Förster, T., Делокализованное возбуждение и передача возбуждения ., В Modern Quantum Chemistry , Sinanoglu, O. (ed.), Academic Press, New York, pages 93-137 (1965). | Книги Эйба |
• Gadella, T. W. J. и Jovin, T. M., Олигомеризация рецепторов эпидермального фактора роста на клетках A431 изучалась с помощью флуоресцентной микроскопии с временным разрешением.Стереохимическая модель активации рецептора тирозинкиназы ., The Journal of Cell Biology 129: 1543-1558 (1995). | PubMed |
• Гальперин Э., Верхуша В. В., Соркин А., Треххромофорная FRET-микроскопия для анализа мультипротеиновых взаимодействий в живых клетках ., Nature Methods 1: 209-217 (2004). | PubMed |
• Готье, И., Трамье, М., Дюрье, К., Коппи, Дж., Пансу, Р. Б., Nicolas, JC, Kemnitz, K., and Coppey-Moisan, M., Homo-FRET-микроскопия в живых клетках для измерения перехода мономер-димер GFP-меченных белков ., Biophysical Journal 80: 3000- 3008 (2001). | PubMed |
• Gordon, GW, Berry, G., Liang, XH, Levine, B., and Herman, B., Количественные измерения флуоресцентного резонансного переноса энергии с использованием флуоресцентной микроскопии ., Biophysical Journal 74: 2702- 2713 (1998). | PubMed |
• Gryczynski, Z., Gryczynski, I., and Lakowicz, JR, Basics of Fluorescence and FRET ., In Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN ( .), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 21-56 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Harpur, A. G., Wouters, F. S. и Bastiaens, P. I.H., Визуализация FRET между спектрально подобными молекулами GFP в отдельных ячейках ., Nature Biotechnology 19: 167-169 (2001). | PubMed |
• Haustein, E., Jahnz, M. и Schwille, P., Triple FRET: инструмент для изучения дальнодействующих молекулярных взаимодействий ., ChemPhysChem 4: 745-748 (2003). | PubMed |
• He, L., Gramer, AC, Wu, X. и Lipsky, PE, TRAF3 образует гетеротримеры с TRAF2 и модулирует его способность опосредовать активацию NF-каппа B ., The Journal of Biological Chemistry 279: 55855-55865 (2004). | PubMed |
• Heim, R., Зеленые флуоресцентные белковые формы для передачи энергии ., Методы в энзимологии 302: 408-423 (1999). | PubMed |
• Герман Б., Микроскопия резонансного переноса энергии ., Методы клеточной биологии 30: 219-243 (1989). | PubMed |
• Hink, M.A., Visser, N.A., Borst, J. W., van Hoek, A., and Visser, A. J. W. G., Практическое использование скорректированных спектров возбуждения и испускания флуоресценции флуоресцентных белков в исследованиях Фёрстеровского резонансного переноса энергии (FRET) ., Journal of Fluorescence 13: 185-188 (2003). | J Флуоресценция |
• Hohng, S. и Ha, T., Одномолекулярный FRET ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press , New York, pages 165–179 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Hoppe, A., Christensen, K., and Swanson, J. A., Стехиометрия на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии в живых клетках ., Biophysical Journal 83: 3652-3664 (2002). | PubMed |
• Jares-Erijman, E. A. и Jovin, T. M., FRET imaging ., Nature Biotechnology 21: 1387-1395 (2003). | PubMed |
• Karasawa, A., Araki, T., Nagai, T., Mizuno, H., and Miyawaki, A., Голубой и оранжевый флуоресцентные белки в качестве пары донор / акцептор для резонансной передачи энергии флуоресценции ., Биохимический журнал (Великобритания) 381: 307-312 (2004). | PubMed |
• Карпова, Т.С., Бауман, К.Т., Хе, Л., Ву, X., Граммер, А., Липски, П., Хагер, Г.Л., и МакНалли, Дж. Г., Перенос энергии резонанса флуоресценции от голубого к желтому флуоресцентному белок, обнаруженный акцепторным фотообесцвечиванием с использованием конфокальной микроскопии и одиночного лазера ., Journal of Microscopy 209: 56-70 (2003). | PubMed |
• Китинг Э., Браун С. М. и Петерсен Н. О., Картирование молекулярных взаимодействий и транспорта в клеточных мембранах с помощью спектроскопии корреляции изображений ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, R. N. (eds.), Oxford University Press, New York, pages 284-301 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Kenworthy, A.K., Визуализация белок-белковых взаимодействий с использованием флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии ., Methods 24: 289-296 (2001). | PubMed |
• Кенуорти А.К., Фотообесцвечивание FRET Microscopy ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, R. N. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 146-164 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Kenworthy, AK, Petranova, N., and Edidin, M., FRET-микроскопия с высоким разрешением B-субъединицы холерного токсина и GPI-заякоренных белков в плазматических мембранах клеток ., Molecular Biology of the Cell 11: 1645-1655 (2000). | PubMed |
• Кикучи, К., Сенсоры FRET на основе малых молекул, которые обеспечивают ратиометрическую визуализацию живых клеток ., Bioimages 12: 55-60 (2004). | Биоизображения |
• Kretsinger, RH, Белки и поток информации в клеточной функции ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 1-20 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Laib, S.и Seeger, S., Исследования FRET взаимодействия димерных цианиновых красителей с ДНК ., Journal of Fluorescence 14: 187-191 (2004). | PubMed |
• Lidke, DS, Nagy, P., Barisas, BG, Heintzmann, R., Post, JN, Lidke, KA, Clayton, AHA, Arndt-Jovin, DJ, and Jovin, TM, Визуализация молекулярных взаимодействий в клетках по динамической и статической анизотропии флуоресценции (rFLIM и emFRET) ., Biochemical Society Transactions 31: 1020-1027 (2003). | PubMed |
• Mattheyses, A. L., Hoppe, A. D., and Axelrod, D., Поляризованная флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии ., Biophysical Journal 87: 2787-2797 (2004). | PubMed |
• Majoul, I., Анализ действия бактериальных токсинов в живых клетках с помощью флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) ., International Journal of Medical Microbiology 293: 495-503 (2004). | PubMed |
• Mills, JD, Stone, JR, Okonkwo, DO, Periasamy, A., and Helm, GA, Многофотонная микроскопия FRET для определения локализации белка в ткани ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 112-125 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Миллс, Дж. Д., Стоун, Дж. Р., Рубин, Д. Г., Мелон, Д. Э., Оконкво, Д. О., Периасами, А., и Хелм, Г. А., Освещение взаимодействия белков в ткани с использованием конфокальной и двухфотонной флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии ., , Journal of Biomedical Optics 8: 347-356 (2003). | PubMed |
• Mitra, RD, Silva, CM, and Youvan, DC, Флуоресцентный резонансный перенос энергии между производными зеленого флуоресцентного белка, излучающими синий цвет и смещенными в красный цвет, ., Ген 173: 13-17 ( 1996). | PubMed |
• Miyawaki, A., Визуализация пространственной и временной динамики внутриклеточной передачи сигналов ., Developmental Cell 4: 295-305 (2003). | PubMed |
• Miyawaki, A., Sawano, A., and Kogure, T., Освещение клеток: мечение белков с помощью флуорофоров ., Imaging in Cell Biology 5: S1-S7 (2003). | PubMed |
• Miyawaki, A. и Tsien, R. Y., Мониторинг конформаций и взаимодействий белков с помощью флуоресцентного резонансного переноса энергии между мутантами зеленого флуоресцентного белка ., Методы в энзимологии 327: 472-500 (2000). | Методы в энзимологии |
• Mizuno, H., Sawano, A., Eli, P., Hama, H., and Miyawaki, A., Красный флуоресцентный белок из Discosoma в качестве тега слияния и партнера для передачи энергии резонанса флуоресценции ., Biochemistry 40: 2502-2510 (2001). | PubMed |
• Нашми Р., Фрейзер С. Э., Лестер Х. А. и Дикинсон М. Э., Измерения FRET с использованием мультиспектральных изображений ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, R. N. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 180-192 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Ng, T., Squire, A., Hansra, G., Bornancin, F., Prevostel, C., Hanby, A., Harris, W., Barnes, D., Schmidt, S., Mellor, H., Bastiaens, PIH, и Parker, PJ, Визуализация активации протеинкиназы C- альфа в клетках ., Science 283: 2085-2089 (1999). | PubMed |
• Nguyen, A. W. и Daugherty, P. S., Эволюционная оптимизация флуоресцентных белков для внутриклеточного FRET ., Nature Biotechnology 23: 355-360 (2005). | PubMed |
• Patel, RC, Kumar, U., Lamb, DC, Eld, JS, Rocheville, M., Grant, M., Rani, A., Hazlett, T., Patel, SC, Gratton, E., and Patel, YC, Связывание лиганда с рецепторами соматостатина вызывает образование рецептор-специфических олигомеров в живых клетках ., Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 99: 3294-3299 (2002). | PubMed |
• Patterson, G.H., Piston, D. W. и Barisas, B.G., Расстояния Ферстера между парами зеленых флуоресцентных белков ., Analytical Biochemistry 284: 438-440 (2000). | PubMed |
• Periasamy, A., Микроскопия флуоресцентного резонансного переноса энергии: мини-обзор ., Journal of Biomedical Optics 6: 287-291 (2001). | PubMed |
• Periasamy, A. и Day, R. N., Визуализация белковых взаимодействий в живых клетках с использованием цифровой визуализации GFP и микроскопии FRET ., Methods in Cell Biology 58: 293-314 (1999). | PubMed |
• Periasamy, A. и Day, R. N., Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy ., Oxford University Press, New York, 312 pages (2005). | Молекулярная визуализация |
• Петр, М., Ameer-Beg, SM, Hughes, MKY, Keppler, MD, Prag, S., Marsh, M., Vojnovic, B., and Ng, T., Многофотонное определение FLIM пары EGFP-mRFP1 FRET для локализации взаимодействий мембранный рецептор-киназа ., Biophysical Journal 88: 1224-1237 (2005). | PubMed |
• Pollok, B.A. и Heim, R., Использование GFP в приложениях на основе FRET ., Trends in Cell Biology 9: 57-60 (1999). | PubMed |
• Рамануджан, В.K., Zhang, J.-H., Centonze, VE, and Herman, B., Строчная флуоресцентная микроскопия для визуализации времени жизни: новая технология для количественной визуализации FRET ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 227-238 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Редфорд, Г. и Клегг, Р. М., Визуализация времени жизни флуоресценции и FRET в реальном времени с использованием усилителей изображения с быстрым стробированием ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, R. N. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 193-226 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Rizzo, MA, Magnuson, MA, Drain, PF и Piston, DW, Функциональная связь между связыванием глюкокиназы с гранулами инсулина и конформационными изменениями в ответ на глюкозу и инсулин ., Journal of Biological Chemistry 277 : 34168-34175 (2002). | PubMed |
• Rizzo, M. A. и Piston, D. W., Высококонтрастное изображение флуоресцентного белка FRET с помощью флуоресцентной поляризационной микроскопии ., Biophysical Journal 88: L14-L16 (2005). | PubMed |
• Rizzuto, R., Brini, M., De Giorgi, F., Rossi, R., Heim, R., Tsien, RY, and Pozzan, T., Двойное мечение субклеточных структур GFP, нацеленным на органеллы мутанты in vivo ., Current Biology 6: 183-188 (1996). | PubMed |
• Schaufele, F., Demarco, I., and Day, RN, FRET изображения в широкоугольном микроскопе ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 72-94 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Schüttrigkeit, TA, Zachariae, U., von Feilitzsch, T., Wiehler, J., von Hummel, J., Steipe, B., and Michel-Beyerle, Пикосекундное временное разрешение FRET в флуоресцентном белке из Discosoma Red (wt-DsRed) ., ChemPhysChem 5: 325-328 (2001). | ХимФисХим |
• Sekar, R. B. и Periasamy, A., Флуоресцентная микроскопия с резонансным переносом энергии (FRET), визуализация локализации белков живых клеток ., Journal of Cell Biology 160: 629-633 (2003). | PubMed |
• Селвин П. Р., Флуоресцентный резонансный перенос энергии ., Методы в энзимологии 246: 300-334 (1995). | Методы в энзимологии |
• Селвин П. Р., Возрождение резонансной передачи энергии флуоресценции ., Nature Structural Biology 7: 730-734 (2000). | PubMed |
• Siegel, RM, Chan, FK-M., Zacharias, DA, Swofford, R., Holmes, KL, Tsien, RY, and Lenardo, MJ, Измерение молекулярных взаимодействий в живых клетках путем флуоресцентного резонансного переноса энергии между варианты зеленого флуоресцентного белка ., Science’s STKE 38: PL1 (2000). | PubMed |
• Саутто, М., Сюй, Ю. и Джонсон, С.Х., Биолюминесцентный резонансный перенос энергии: методы и потенциал RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 260-271 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Squire, A., Verveer, P.J., Rocks, O., and Bastiaens, P.I.H., Микроскопия анизотропии красного края позволяет динамическое отображение гомо-FRET между зелеными флуоресцентными белками в клетках ., Journal of Structural Biology 147: 62-69 (2004). | PubMed |
• Стэнли, К. М., Введение в FRET с упором на задействованную оптику ., Chroma Technology Corp., Рокингем, Вермонт, Примечания по применению Chroma 6: 1-14 (2003). | Технология Chroma |
• Стэнли, К.M., Введение в фильтры и зеркала для FRET ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, Нью-Йорк, стр. 57 -71 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Страйер, Л., Перенос энергии флуоресценции как спектроскопическая линейка ., Annual Review of Biochemistry 47: 819-846 (1978). | PubMed |
• Талер, К., Кушик, С. В., Бланк, П. С., и Фогель, С. С., Количественная многофотонная спектральная визуализация и ее использование для измерения резонансной передачи энергии ., Biophysical Journal 89: 2736-2749 (2005). | PubMed |
• Ting, AY, Kain, KH, Klemke, RL, and Tsien, RY, Генетически кодируемые флуоресцентные репортеры активности протеинтирозинкиназы в живых клетках ., Proceedings of the National Academy of Sciences (USA) 98 : 15003-15008 (2001). | PubMed |
• Tramier, M., Gautier, I., Piolot, T., Ravalet, S., Kemnitz, K., Coppey, J., Durieux, C., Mignotte, V., Coppey-Moisan, M., Пикосекундная гетеро-FRET микроскопия для исследования белок-белковых взаимодействий в живых клетках ., Biophysical Journal 83: 3570-3577 (2002). | PubMed |
• Tron, L., Szollosi, J., Damjanovich, S., Helliwell, S.H., Arndt-Jovin, D. J., Jovin, T. M., Проточно-цитометрическое измерение переноса энергии резонанса флуоресценции на поверхности клеток.Количественная оценка эффективности переноса для каждой клетки ., Biophysical Journal 45: 939-946 (1984). | PubMed |
• Truong, K., Sawano, A., Mizuno, H., Hama, H., Tong, KI, Mal, TK, Miyawaki, A., and Ikura, M., FRET на основе in vivo визуализация кальция с помощью новой слитой молекулы кальмодулин-GFP ., Nature Structural Biology 8: 1069-1073 (2001). | PubMed |
• Цзянь Р.Y., Bacskai, B.J. и Adams, S. R., FRET для изучения внутриклеточной передачи сигналов ., Trends in Cell Biology 3: 242-245 (1993). | PubMed |
• Uster, PS и Pagano, RE, Микроскопия резонансного переноса энергии: наблюдения за мембранно-связанными флуоресцентными зондами в модельных мембранах и живых клетках ., The Journal of Cell Biology 103: 1221-1234 (1986) . | PubMed |
• Валентин, Г., Verheggen, C., Piolot, T., Neel, H., Coppey-Moisan, M., and Bertrand, E., Фотопреобразование YFP ​​в CFP-подобные частицы во время экспериментов FRET по фотообесцвечиванию акцепторов ., Nature Методы 2: 801 (2005). | PubMed |
• van Munster, EB, Kremers, GJ, Adjobo-Hermans, MJW, and Gadella, TWJ, Jr., Измерение резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET) путем постепенного фотообесцвечивания акцептора ., Journal of Microscopy 218: 253-262 (2005). | PubMed |
• van Rheenen, J., Langeslag, M., and Jalink, K., Корректировка конфокального сбора для оптимизации отображения резонансного переноса энергии флуоресценции с помощью сенсибилизированного излучения ., Biophysical Journal 86: 2517-2529 ( 2004 г.). | PubMed |
• van Roessel, P. и Brand, A.H., Визуализация в будущее: визуализация экспрессии генов и взаимодействия белков с флуоресцентными белками ., Nature Cell Biology 4: E15-E20 (2002). | PubMed |
• van Thor, JJ и Hellingwerf, KJ, Применение флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) с использованием зеленого флуоресцентного белка ., В Зеленый флуоресцентный белок: приложения и протоколы (методы в молекулярной биологии, том 183) , Хикс, Б.В. (ред.), Humana Press, Тотова, Нью-Джерси, страницы 101-119 (2002). | Amazon |
• Вандерклиш, П. В., Крушель, Л. А., Холст, Б. Х., Галли, Дж. А., Кроссин, К.L., and Edelman, G.M., Маркировка синаптической активности в дендритных шипах субстратом кальпаина, проявляющим флуоресцентный резонансный перенос энергии ., Proceedings of the National Academy of Sciences (USA) 97: 2253-2258 (2000). | PubMed |
• Wallrabe, H. и Barroso, M., Конфокальная микроскопия FRET: исследование кластерного распределения комплексов рецептор-лиганд в эндоцитарных мембранах ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 95-111 (2005). | Молекулярная визуализация |
• Wallrabe, H., Elangovan, M., Burchard, A., Periasamy, A., and Barroso, M., Конфокальная микроскопия FRET для измерения кластеризации комплексов лиганд-рецептор в эндоцитарных мембранах ., Biophysical Журнал 85: 559-571 (2003). | PubMed |
• Wallrabe, H. и Periasamy, A., Визуализация белковых молекул с использованием микроскопии FRET и FLIM ., Current Opinion in Biotechnology 16: 19-27 (2005). | PubMed |
• Wallrabe, H., Stanley, M., Periasmy, A., and Barroso, M., Одно- и двухфотонная флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии для установления кластерного распределения комплексов рецептор-лиганд в мембранах эндоцитов ., Journal of Biomedical Optics 8: 339-346 (2003). | PubMed |
• Уотроб, Х. М., Пан, К.-П., и Баркли, М.D., Двухступенчатый FRET как структурный инструмент ., Журнал Американского химического общества 125: 7336-7343 (2003). | PubMed |
• Weiss, S., Измерение конформационной динамики биомолекул с помощью флуоресцентной спектроскопии одиночных молекул ., Nature Structural Biology 7: 724-729 (2000). | PubMed |
• Ву П. и Бранд Л., Резонансная передача энергии: методы и применение ., Analytical Biochemistry 218: 1-13 (1994). | Аналитическая биохимия |
• Xia, Z. and Liu, Y., Надежное и глобальное измерение резонансного переноса энергии флуоресценции с использованием флуоресцентных микроскопов ., Biophysical Journal 81: 2395-2402 (2001). | PubMed |
• Yang, X., Xu, P., and Xu, T., Новая пара для меж- и внутримолекулярного измерения FRET ., Biochemical and Biophysical Research Communications 330: 914-920 ( 2005). | PubMed |
• Zaccolo, M., Использование химерных флуоресцентных белков и резонансного переноса энергии флуоресценции для мониторинга клеточных ответов ., Circulation Research 94: 866-873 (2004). | PubMed |
• Зал Т. и Гаскойн Н. Р. Дж., Визуализация живых клеток с поправкой на фотообесцвечивание FRET ., Biophysical Journal 86: 3923-3939 (2004). | PubMed |
• Чжан Дж., Ma, Y., Taylor, SS, and Tsien, RY, Генетически кодируемые репортеры активности протеинкиназы A показывают влияние связывания субстрата ., Proceedings of the National Academy of Sciences 98: 14997-15002 (2001 ). | PubMed |
• Zimmerman, T., Rietdorf, J., Girod, A., Georget, V., and Pepperkok, R., Спектральная визуализация и линейное размешивание позволяют повысить эффективность FRET с помощью новой пары FRET GFP2-YFP ., FEBS Letters 531: 245-249 (2002). | PubMed |

Обзор Gear: Collings 001 14-ладовая акустическая гитара

Из выпуска Acoustic Guitar за июль / август 2020 года | Грег Олвелл | Видео-демонстрация от Мими Фокс

Даже через несколько недель после получения недавно построенного Collings 001 14-Fret, его дуэльные ароматы дерева и нитроцеллюлозного лака продолжают восхищать, когда они доносятся вокруг моего дома, заставляя меня время от времени задумчиво останавливаться, чтобы Заметьте: «О, что-то приятно пахнет», прежде чем понять, что гитара на подставке, сидящая рядом со мной на диване, является источником моего обонятельного счастья.Поскольку я считаю, что гитары полезны практически в любом месте, я никогда не приходил в восторг от термина «кушетка». Но вот Collings 001 14-Fret прямо у моего дивана ждет, чтобы на нем сыграли в те редкие моменты, когда он еще не в моих руках.

001 14-ладный — это последний стиль корпуса Коллингса, и, как видно из названия, это 14-ладовая версия 12-лада 00. Он получил много игрового времени, не только потому, что укрытие в Размещение заказа означает, что я прикован к дому со своей семьей, но поскольку это необычайно хорошо сделанная гитара с отличной игрой, которая, кажется, способна поднять настроение даже самому элементарному любителю пальцев — например, мне — и явно подойдет любому музыканту, ищущему всестороннюю игру. тембр в компактном инструменте.

Surprising Volume and Balance
Как и все гитары Collings, 14-ладная гитара 001 доступна как в стандартной, так и в традиционной упаковке, а также в различных вариантах исполнения из дерева. Начальная цена базовой модели из ели и красного дерева (согласно обзору) в 4300 долларов может быть значительной по сравнению с новыми и винтажными гитарами в стиле 00-18, которые вдохновили ее. Но эта цена открывает двери для инструмента, созданного производителем, который десятилетиями славился бескомпромиссными материалами, конструкцией, настройкой или тоном.

В этой новой форме, вдохновленной 14-ладами Martin 00 с нижним выступом на 14-1 / 2 дюйма, впервые появившимся в 1934 году, Коллингс стремится объединить более теплые низкие частоты в среднечастотном диапазоне, чем это типично для меньшего корпуса с корпусом объем большего кузова, все в очень удобной упаковке. Время, проведенное с инструментом, подтверждает, что Коллингс достиг этой цели, но я бы добавил, что тон удивительно сбалансирован для моих ушей и ощущается очень равномерно распределенным между низкими, высокими и средними частотами. Это похоже на плоский эквалайзер на качественном предусилителе — чистое совершенство, дающее место для выразительной игры.

Какими бы удивительными ни были громкость этой большой концертной гитары — и она будет для тех, кто привык к более крупным инструментам — 001 14-Fret действительно немного потерялся с прямым басом и вокалом на акустическом концерте в оживленном ресторане в Сане. Франциско. Тем не менее, один из товарищей по группе использовал его в качестве части сета, и это было настоящим удовольствием, когда он играл свои любимые песни Джона Хёрта из Миссисипи. Он, безусловно, издает приятные звуки, когда вы находитесь на сиденье водителя, но все хорошие качества 001 сияют еще ярче с точки зрения публики: теплые средние частоты, плотные и настоящие басы и чистые высокие частоты, которые отлично подходят для бренчания аккордов, игры синглов. нотные линии, рэгтайм и блюз с открытой настройкой.

Укороченная шкала размером 24–7 / 8 дюймов также позволяет легко выполнять изгибы и аккорды. Я сравнил 001 14-Fret с моим Waterloo WL-S с аналогичными пропорциями, и в то время как Waterloo с лестничными скобами имеет немного больше мощности для быстрой игры аккордов, Collings с их зубчатым X-образным креплением довоенного стиля предлагает более детализированный высокий звук. -конечный блеск и низкочастотный стук.

Превосходная посадка и отделка
Было бы упущением не упомянуть материалы и конструкцию, подгонку и отделку.Как и следовало ожидать от гитары этого ценового диапазона, все от выноса до кормы исключительное. Верхняя часть из ели ситкинской имеет очень плотное волокно и огромное количество шелковистых волокон (сердцевинных лучей), что люди восклицают как знак качества, что придает дереву очаровательное трехмерное качество. Естественно темное эбеновое дерево, используемое для бриджа, головы и накладки грифа, привлекает внимание и подчеркивает вариации текстуры древесины. Гриф имеет небольшой V-образный профиль, который становится немного острее по направлению к верхним частям, и это действительно удобное место для беспокойной руки.

Если вы ищете удобную гитару, на которой можно часами играть, и открыты для удивительной универсальности и гармоничного звучания 00, Collings 001 14-Fret вполне заслуживает тест-драйва. Он обеспечивает неопровержимо превосходные материалы и конструкцию гитары, которая никогда не перестанет впечатлять своим звучанием, внешним видом и ощущениями.

ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

КОРПУС Столешница из ели ситкинской с зубчатыми крестообразными распорками довоенного образца; Гондурасское красное дерево сзади и по бокам; черепаховая вязка с четырехслойной прошивкой; Спинка из орехового дерева 1 фасона; черепаховая накладка; блестящая нитроцеллюлозная отделка

ШЕЯ Гриф из красного дерева в масштабе 24-7 / 8 ″ с измененным V-образным профилем и регулируемым анкерным стержнем; гриф из черного дерева с перламутровыми маркерами положения; 20 мельхиоровых ладов, ширина порожка 1-11 / 16 ″; никелевые тюнеры Waverly 16: 1; накладка из черного дерева с перламутровым логотипом Collings; отделка из высокоглянцевой полиэфирной смолы

ДРУГОЕ Мостовидный протез в виде живота из черного дерева с костяной опорой и шагом 2-3 / 16 ″; штифты моста и концевой штифт из черного дерева; Струны D’Addario EJ16 (.

No related posts.